谷丙转氨酶（ALT/GPT）测试盒（比色法），在 37℃及 PH7.4 条件下，作用于丙氨酸及α-酮戊二酸组成的底物，生成丙酮酸及谷-氨-酸。

谷丙转氨酶（ALT/GPT）测试盒（比色法）

（货号:C009-1-1 比色法）

一、测定原理：

谷丙转氨酶（ALT）在 37℃及 PH7.4 条件下，作用于丙氨

酸及α-酮戊二酸组成的底物，生成丙酮酸及谷-氨-酸。反应 30min

后（固定时间）加入 2,4-二硝基苯肼（DNPH）盐酸溶液，既中

止反应，同时 DNPH 与酮酸中羰基加成，生成丙酮酸苯腙。苯腙

在碱性条件下呈红棕色，于 505nm 比读吸光度并计算酶活力。

二、试剂的组成与配制：(100 管/50 样)

试剂一:谷丙转氨酶基质液，50mL×1 瓶，4℃冰箱保存 6 个月；

试剂二:2,4—二硝基苯肼液，50mL×1 瓶，4℃冰箱保存 6 个月；

试剂三:4mol/L 氢氧化钠液，50mL×1 瓶，室温密封保存 6 个月；

0.4mol/L 氢氧化钠液的配制：临用时按 4mol/L 氢氧化钠液：双

蒸水=1∶9 的比例稀释，需多少配多少，室温密封保存。

试剂四:2mmol/mL 丙酮酸钠标准液 1 支，4℃冰箱保存 6 个月；

试剂五:0.1mol/L 磷酸盐缓冲液 1 支，4℃冰箱保存 6 个月。

三、操作过程：

1、血清及细胞培养液的测定：直接取样进行测定。

四、注意事项：

1、比色法中常用的有赖氏（Reitman-Frankel）法及金氏（King）

法。赖氏法标准曲线所定单位数，是用实验方法和卡门氏分

光光度法（速率法）作对比测定求得的。以卡门氏单位报告

结果，比较准确。卡门氏单位定义为：1mL 血清，反应液总

容量 3mL，波长 340nm，1cm 光径，25℃，1min 内所生成的

丙酮酸，使 NADH 氧化成 NAD+而引起吸光度每下降 0.001

为一个单位（1 卡门氏单位=0.482 IU/L，25℃）。

2、一般血清标本内源性丙酮酸很少，个体相差也不大，作大

批标本测定时，不需每份标本都作对照管，严重脂血、黄疽、

溶血及陈旧血清须作自身对照管。建议对活力单位超过正常

尤其是在临界时，进行复测；复测时每份标本均作对照管。

3、酶活力超过 150 单位时，用盐水稀释血清后重测。

4、应将一般血清的对照管（或称标本空白管）的吸光度作为

日常质控的指标之一；如相差大，可考虑α-酮戊二酸浓度、

DNPH 浓度及仪器等原因引起。

5、血清中 ALT 在室温（25℃）可保存 2 天，在 4℃可保存一

周，在-25℃可保存 1 个月。

附录Ⅰ：ALT 标准曲线

1、操作表

【注】：标准曲线需要客户自己制作才更准确，操作步骤参照上

表；上表所列的卡门氏单位数值与各标准孔的标准品加

样量是对应的，所以该值固定不变，客户可以由此值和

自己按操作表求得的各标准孔的吸光值作多项式曲线

（R 2≥0.99），得到计算公式用于样本计算。

谷丙转氨酶（ALT/GPT）测试盒（比色法）