谷-胱甘肽—S 转移酶测定试剂盒，适用于检测血清、组织、培养细胞等中谷-胱甘肽-S 转移酶的活性。可见分光光度计(412nm)、37℃恒温水浴箱、低速离心机。

谷-胱甘肽—S 转移酶测定试剂盒

（Glutathione S-transferase GST 比色法）

二、适用范围:

本试剂盒适用于检测血清、组织、培养细胞等中谷-胱甘肽-S 转移酶的活性。

三、所需仪器:

可见分光光度计(412nm)、37℃恒温水浴箱、低速离心机

四、样本前处理

1、50 倍稀释的溶血液的配制：取肝素抗凝全血 20μL，以双蒸水稀释至 1mL，混匀，放置 5 分钟

进行测定。 配制好的溶血液要在 1 小时内测定完，否则影响酶活力；抗凝全血若当天来不及

测定可放冰箱 4℃保存，2～3 天内酶活力变化不大。

2、组织匀浆、线粒体、微粒体等的制备见实验方法学部分。

3、血清或血浆可以直接取样。

六、测定意义:

谷-胱甘肽 S—转移酶（glutathione S—transferase GST）是一类与肝脏解毒有关的酶，在肝细

胞中存在量很大，所以当肝细胞受损害时，GSH-ST 常常很早释放到血中，血中 GSH-ST 的升高

常常早于谷丙转氨酶（SGPT）和谷草转氨酶（SGOT），因而 GSH-ST 的升高可作为肝脏损伤的

敏感指标。

谷-胱甘肽 S—转移酶广泛存在于哺乳动物各组织中，催化谷-胱甘肽（GSH）与化学物质的亲

电子基团结合，最-终形成硫醚氨酸排出体外，在体内解毒功能上起重要作用。

GSH-ST 具有消除体内氧化物及解毒双重功能。GST 在谷-胱甘肽氧化物酶（GSH-PX）

活力低下的条件下，只有清除体内脂质氧化物（LPO）的功能。

七、测定原理:

谷-胱甘肽+1-氯-2,4-*

GST

谷-胱甘肽*复合物+盐酸

(GSH+C6H3（NO2）2Cl)

GST

C6H3（NO2）2GS+H++Cl -

GST 具有催化还原型谷-胱甘肽（GSH）与 1-氯-2,4-*（CDNB 底物）结合的能力，

在一定反应时间内，其活性高低与反应前后底物浓度的变化呈线性关系。

本实验通过检测 GSH 浓度的高低来反应 GST 活力的大小，GSH（底物）浓度降低越多则

GST 活力越大。

八、注意事项:

1、管子要洗干净，先用温肥皂水刷净，再用自来水冲 20 遍以上，最后用双蒸水过 1-2 次后烘干

即可。

2、2 号试剂配制时要加热充分溶解（温度可达 90℃～100℃）。

3、肝素抗凝全血放置冰箱存放时间不可超过 3 天，血浆、组织块放-20℃可保存一个月以上。

4、1 号试剂配成贮备液后，冰箱冷藏至少可保存一个月。

5、1mmol/L 的 GSH 底物现用现配。

6、上清液当天提取，当天测试。

7、组织蛋白的测定方法有多种，本研究所有供应。

8、样品前处理参照实验方法学部分。

9、本试剂盒仅用于科研、实验室。

10、正式实验前最-好选取 2 例相对差异较大的样本进行预试，以熟悉操作和确定样本浓度（最

佳样本浓度为对照管OD-测定管OD在0.2左右时为宜，不稀释时达不到0.2则直接原液操作）。

谷-胱甘肽—S 转移酶测定试剂盒