维生素 C(VC)/抗坏血酸(ASA)测定试剂盒 检测服务
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维生素 C(VC)/抗坏血酸(ASA)测定试剂盒 ,本法用 Fe 3+与还原型抗坏血酸迅速作用生成 Fe 2+,后者再与啡罗啉显色反应,可以测定血浆中维生素 C 的含量。
维生素 C(VC)/抗坏血酸(ASA)测定试剂盒
(比色法)
一、 试剂盒组成及配制(50 管/48 样):
试剂一:贮备液 5mL×1 瓶,4℃保存 6 个月。试剂一应用液
配制:用时按照试剂一贮备液:蒸馏水=1:14 稀释,混匀制备。
试剂二:粉剂×1 支,4℃保存 6 个月。试剂二应用液配制:
用时 1 支粉剂加 0.36mL 的冰醋酸再加水至 40mL,
溶解,4℃保存。
试剂三:白色结晶体的粉剂×1 支,4℃保存 6 个月。试剂三
应用液配制:因较难溶解,用前 2~4 小时加 95%
酒精或无水乙醇 60mL 充分溶解制备,4℃保存。
试剂四:黄色贮备液 0.2mL×1 瓶,冰箱 4~8℃避光保存,
贮存时间 6 个月。试剂四应用液配制:用时取
0.15mL 试剂四贮备液加水至 25mL 制备。(现用现配)
试剂五:液体 6mL´1 瓶,4℃保存 6 个月。
试剂六:Vc 标准品:粉剂 6mg×3 支,每瓶内含维生素 C,
4℃避光保存 6 个月。
600mg/mL Vc 标准品应用液配制:将 1 支标准品粉剂溶于
10mL 试剂一应用液中,制备。
6mg/mL Vc 标准品应用液配制:取 600mg/mL Vc 标准品应
用液再用试剂一应用液 100 倍稀释备用,现用现配。
注:维生素 C 标准品易氧化,因此,最好在样本上清液制
备好后再配标准,并在 10 分钟内进行检测。
二、 操作步骤:
1、上清液制备:取样本 0.15mL 加试剂一应用液 0.45mL,旋
涡混匀,放置 15 分钟后离心,3500~4000
转/分,离心 10 分钟,上层清亮液体为上清
液。(注:液体样本可直接取 0.15mL 加试
剂一应用液处理制备上清液;组织样本必须
先制作匀浆(组织匀浆可参考本公司
“技术文章")后取 0.15mL 匀浆液加试剂一
应用液处理制备上清液)
四、 测定原理:
本法用 Fe 3+与还原型抗坏血酸迅速作用生成 Fe 2+,后者
再与啡罗啉显色反应,可以测定血浆中维生素 C 的含量。
五、 测定意义:
维生素 C 在体内参与胶原物质合成,是脯-氨酸羟化酶和
赖氨酸羟化酶的辅因子,是催化多巴胺转变成去-甲肾上腺素
的铜酶多巴β羟化酶所必需,当维生素 C 缺乏时,合成的胶
原得不到充分的羟化,不能很好的形成纤维。
维生素 C 的化学活性是作为还原剂,它可以将
Fe 3+还原成 Fe 2+,促使铁在肠道吸收,促进铁的贮存和利用。
抗坏血酸作为自由基清除剂,可以很快地与 O2 -、H2O2
反应,更快地与 OH-反应生成抗坏血酸自由基,它也可以清
除 O2 -,因此,抗坏血酸可以保护机体免受内源性氧自由基的损伤。
维生素 C 能与a-生育酚自由基还原成维生素 E,间接
地起着链阻断剂作用。
维生素 C 是血浆中的抗氧化剂,是细胞外液抗
氧化防御系统的第一道防线,Vc 对血浆中正在进行着的脂
质过氧化作用也有阻断作用。
维生素 C(VC)/抗坏血酸(ASA)测定试剂盒