葡聚糖凝胶G系列使用说明-上海信帆生物

上海信帆生物供应葡聚糖凝胶G系列产品，备有大量库存现货，质量稳定。

此说明仅限参考

葡聚糖凝胶G 系列使用说明

1 化学和物理性质

葡聚糖凝胶是一种珠状的凝胶，含有大量的羟基，很容易在水中和电解质溶液中溶胀。亲水基质使其

非特异性吸附最小化，并在生物分子分离期间得到较高的回收率。G 型的葡聚糖凝胶有各种不同的交联度，

因此它们的溶胀度和分级分离范围也有所不同。葡聚糖凝胶的溶胀度基本上不因盐和洗涤剂的存在而受影

响。

2 产品说明

产品名称球蛋白分离范围应用最大耐压MPa

葡聚糖凝胶G-10<700 缓冲液交换、脱盐，分离小分子，去除小分子0.15

葡聚糖凝胶G-15<1500 缓冲液交换、脱盐，分离小分子，去除小分子0.15

葡聚糖凝胶G-25 1000-5000 工业上脱盐及交换缓冲液0.15

葡聚糖凝胶G-50 1000-30000 多肽分离、脱盐、清洗生物提取液、分子量测定0.10

葡聚糖凝胶G-75 2000-70000 蛋白分离纯化、分子量测定、平衡常数测定0.016

葡聚糖凝胶G-100 2000-120000 蛋白分离纯化、分子量测定、平衡常数测定0.0096

葡聚糖凝胶G-150 5000-300000 蛋白分离纯化、分子量测定、平衡常数测定0.0096

葡聚糖凝胶G-200 5000-600000 蛋白分离纯化、分子量测定、平衡常数测定0.0096

3 使用方法

Sephadex 系列产品以干粉形式存在，使用前必须溶胀，在膨胀期间应避免过度搅拌，因为它可能破

坏填料，不要使用磁力搅拌器。

3.1 填料的准备

（1）将填料在过量去离子水或缓冲液中，室温条件下膨胀24 小时，或用热水膨胀1 小时（不要水浴！）。

洗脱缓冲液不应含有高粘度的试剂。溶胀过程中，如果上层有漂浮物，请去除。

（2）将溶胀好的填料，所有的缓冲液等材料平衡至实验操作温度，对所有的缓冲液进行脱气处理。

3.2 装柱

（1）检查层析柱所有部件，特别是过滤网，密封圈，螺旋塞是否紧密，玻璃管是否干净和完整。

（2）将柱内及柱子底端用水或缓冲液润湿并保持一小段液位，务必使底端无气泡。

（3）用玻璃棒引导匀浆沿着柱内壁一次性倒入柱内，注意勿使产生气泡。打开柱子出液口，使凝胶

在柱内自由沉降，连结好柱子顶端柱头。

1

（4）打开蠕动泵，让缓冲液用使用时流速的1.33 倍的流速流过，使柱床稳定（注意压力不要超过填

料最大耐压）。

3.3 平衡

上样前平衡层析柱至少5-10 个柱体积直到记录仪基线变得平稳为止（流出液的pH 值和电导值等于

上柱的Buffer 的pH 值和电导值）。

3.4 上样

样品一定要离心或过滤后（0.45um 滤膜）上样。

凝胶过滤的上样量一般为不大于5%的柱床体积，我们建议初次上样控制在1-2%的柱床体积，视分

离情况可以调整；脱盐时上样量可以达到20%的柱床体积，柱高的选择也与分离要求相关，柱子越高，分

离效果相应越好，但是，柱高过高的凝胶柱会引起的反压，也应当尽可能避免。难分离物质要有一定

柱高和流速控制，脱盐时高径比为5：1 即可。

3.5 洗脱方法

可以用无盐水，也可以采用上柱时的缓冲液洗脱。

3.8 在位清洗（CIP）

凝胶使用十次后作一次CIP，目的是去除柱床内沉淀的及顽固残留的蛋白。方法是用0.1 M 氢氧化

钠洗2 个柱体积，再以至少10 个柱体积平衡缓冲液再生。

4 保存

未处理的填料，室温密闭保存。使用完的填料，用纯水将盐分*冲洗，最后保存在20%乙醇中，4℃

保存。

5 注意事项：

（1）上样之前，样品必须经过膜过滤及去除色素，否则杂质及色素会被吸附到填料上，影响填料的

正常使用。所有的缓冲液均需要用0.45um 的过滤器过滤。

（2）在使用过程中，避免使用高浓度的强酸强碱，酸和碱的浓度应低于0.1 摩尔。碱会使流速变慢。

（3）不同的样品，吸附和洗脱方法不相同，可以根据相关的文献进行。

6 不同规格特性

细颗粒：流速慢，分离效果优。

粗颗粒：流速快，分离效果偏差。

中颗粒：流速适中，分离效果适中，一般客户最常选用此型号。

葡聚糖凝胶G系列