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瑞氏-姬姆萨染色液的详细操作方法

更新时间:2022-10-25   点击次数:565次

瑞氏-姬姆萨染色液的详细操作方法


产品简介 
瑞氏-姬姆萨染色液是利用Romanowsky Stain技术原理改良而成的。细胞的着色过程是染料透入被染物并存留其内部的一种过程,此过程既有物理吸附作用,又有化学亲和作用。各种细胞及细胞的各种成分由于其化学性质不同,对瑞氏-姬姆萨染色液中的酸性染料( 曙红 )和碱性染料的亲和力也不一样。因此,标本切片和涂片经瑞氏-姬姆萨染色液染色后,相应各类细胞呈现不同的着色,从而达到辨别其形态特征的目的。

Wright-Giemsa Staining Solution 以进口瑞氏色素和姬姆萨色素为主要原料,通过研磨配制而成,能呈现出清晰的细胞染色效果。经常用于血液和细胞涂片、骨髓细胞涂片、细菌染色。细胞质呈红色,细胞核及细菌呈蓝色,嗜酸性颗粒呈橘红色。

该染液的特点: 由瑞氏-姆姆萨复合染色液和磷酸盐缓冲液组成,等量混合使用或分别处理标本使用。

试剂保存:原包装未开封染色液的有效期为2年,在有效期内的已开封染色液应在开封后12个月内使用完,每次用后及时拧紧瓶盖,以免挥发或变质。 储存条件:密封,阴凉通风处避光保存。

产品组分 
Componets 2×100ml 2×250ml 2×500ml
A液:瑞氏-姬姆萨快速染色液
Wright-Giemsa Quick Stain Kit 100ml 250ml 500ml
B液:磷酸盐缓冲液
Phosphate Buffer 100ml 250ml 500ml

样本要求
1、血细胞涂片染色:要求新鲜全血或EDTA(2K)抗凝血。
2、阴道分泌物(妇科白带)涂片染色:新鲜标本离开人体涂片后,需尽快以火焰或酒精固定,以避免细胞变形。
3、骨髓涂片染色:涂片制成后,应在空气中快速摇动或扇干,防止细胞皱缩变形或因空气潮湿而溶血,绝对不能用高温或火烤。
4、脱落细胞涂片染色:采取检体并涂片,待检涂片固定可采用自然干燥法或湿片固定液固定法(具体操作可根据不同检体及所采用的固定液所对应的规范操作要求进行)。一般情况下若采用湿片固定法,标本浸泡时间稍长些,效果会更佳。若采用湿片固定液固定标本,固定液用后需经常过滤,更换,防止细胞交叉污染。

使用参考 
1.常规方法制备血液涂片或骨髓涂片或细菌涂片,待涂片自然干燥。
2.将切片、血液涂片或骨髓涂片置于染色架上。
3.滴加适量瑞氏-姬姆萨复合染液覆盖切片、涂片,室温染色1分钟。
4.滴加等量磷酸盐缓冲液,轻轻晃动玻片或采用其他方式混合,使磷酸盐缓冲液与瑞氏-姬姆萨复合染液混匀室温静置(血涂片1-5分钟,骨髓涂片10-30分钟)。
5.步骤3、4亦可以采用如下方法:取瑞氏-姬姆萨复合染液和磷酸盐缓冲液等量混合,即为瑞氏-姬姆萨工作液,滴加该工作液于血液涂片或骨髓涂片上室温静置1-2分钟(骨髓片适当延长染色时间, 胸腹水等涂片, 宜在固定后加双倍缓冲液, 淡染为好)。。
6.用磷酸盐缓冲液等量稀释后,冲洗玻片,时间控制在30s左右。(注:也可用自来水或蒸馏水从玻片一端轻轻冲洗)
7.干燥。
8.镜检:先用低倍镜观察血涂片,再用油镜。

染色结果 
血细胞涂片、骨髓涂片染色:红细胞呈粉红色,细胞核紫红色,核仁呈蓝紫色。白细胞浆中颗粒清楚,并显示出各种细胞*的色彩。细胞质随着分化程度的不同,其嗜碱性程度也有变化,呈深浅不等的蓝色。

注意事项 
1、血液涂片或骨髓涂片应厚薄均匀,以免影响染色效果。
2、涂片染色中,请勿先去除染液或直接对涂片用力冲洗。不能先倒掉染液,以免染料沉着于涂片上。
3、染色液可重复使用,但不能多次重复,若有沉淀物应过滤后使用。
4、染色过深可用甲醇或乙醇适当脱色,最好不复染。
5、如果染色过深或过浅,应调整染色时间或工作液浓度。
6、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。


瑞氏-姬姆萨染色液的详细操作方法

 

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