种子TTC染色液的正确使用方法

TTC（2，3，5-氯化三苯基四氮唑），是一种脂溶性光敏感复合物，可用于检测种子的生存能力，或检测哺乳动物组织的缺血梗塞。其基本原理在于，TTC是呼吸链中吡啶——核苷结构酶系统的质子受体，能与正常组织中的脱氢酶反应生成不溶于水的红色三苯基甲臜（TTF）化合物。正常组织和有活力的种子中富含脱氢酶，可与TTC反应呈现红色，如果组织缺血梗塞死亡或种子生活力衰退，则不能与TTC反应，组织不能着色或染色很浅。据此可根据染色部位和深浅判定组织缺血梗塞程度或种子活力。

本产品TTC染液中TTC浓度为0.1%，适用于植物种子活力的染色。经染色后，有活力的种子呈红色，无生命力的种子呈白色或黄色。

操作步骤

样本前处理：种子放入水中30-35℃浸泡2-6 h或更长时间，使其充分吸胀。

染色步骤

1. TTC染液经37℃预热30 min。

2. 种子剥离外壳或种皮，纵切均分成两瓣，放入洁净的离心管中。加入TTC染色（种子）浸没样本，37℃水浴锅避光染色30-60 min，期间每隔15 min观察种子着色情况。

3. 当种子出现红色且不再变深时即可倒出染液，向容器内缓慢加入固定液（推荐G1101）浸没组织终止染色反应。样本需避光保存。

4. 拍照前取出组织，用滤纸吸干固定液，根据需要用照相机拍照。

注意事项

1. 染色后的样本易褪色，需尽快拍照。

2. 为了您的安全和健康，操作时请穿实验服并佩戴一次性手套。

种子TTC染色液的正确使用方法