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信帆生物:磷酸肌酸激酶实验技术服务

点击次数:5     更新时间:2026-09-20

信帆生物:磷酸肌酸激酶实验技术服务

信帆生物主营产品: 质控样品,干扰物质,抗体抗原,elisa试剂盒,动物血制品,生化试剂盒等。实验代做服务:HE染色/特殊染色/技术服务、免疫组化实验服务、Western blotting实验服务、RT-PCR实验技术服务,QPCR(荧光定量PCR)、酶联免疫ELISA、生化测试、液相气相检测等。

磷酸肌酸激酶(CK)是参与细胞能量代谢的关键酶,主要分布于骨骼肌、心肌、脑组织,细胞受损后释放到体液,科研常用来评价肌肉、心肌细胞损伤。CK 含 CK-MM、CK-MB、CK-BB 三种同工酶。检测采用酶偶联速率法,37℃条件下 CK 催化磷酸肌酸与 ADP 生成 ATP,经偶联酶反应生成 NADPH,在 340nm 监测吸光度上升速率,计算总酶活性。

 

检测原理(仅供参考):

采用酶偶联速率法,在 37℃恒温缓冲体系中,样本中的磷酸肌酸激酶可催化磷酸肌酸与 ADP 反应生成 ATP,生成的 ATP 在己糖激酶作用下使葡萄糖转化为 6 - 磷酸葡萄糖,再经 6 - 磷酸葡萄糖脱氢酶催化生成 NADPH,该物质在 340nm 处具有特征吸收峰。仪器连续监测吸光度的上升速率,吸光度变化速度与样本中 CK 酶活性成正比,依据朗伯比尔定律即可定量计算磷酸肌酸激酶的活性水平。 

 

实验步骤(仅供参考)

1、试剂准备:试剂盒回温,生化仪参数设置,准备校准品、高低质控、待测样本。

2、加样预孵育:样本与 R1 缓冲试剂混合,37℃恒温预孵育。

3、启动反应:加入 R2 底物试剂,启动酶促反应。

4、光度检测:340nm 连续监测吸光度变化速率。

5、结果计算:用校准品建立校准曲线,计算 CK 总活性,同步测试平行样。

 

送样运输要求:

1、血清样本(干冰运输)

全血标本请于室温放置2小时或4℃过夜(GLU检测请勿全血样本放置过夜取血清)后于2-8℃ 3000转/分离心15min,取上清即可立即检测;或进行分装,并将标本放于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。解冻后的样本应再次离心,然后检测。

2、血浆样本(干冰运输)

可用肝素作为抗凝剂,标本采集后30分钟内于2-8℃3000转/分离心15min,取上清即可立即检测;或进行分装,并将标本放于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。解冻后的样本应再次离心,然后检测。


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