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信帆生物提供:硫磺素S染色实验技术服务
信帆生物主营产品: 质控样品,干扰物质,抗体抗原,elisa试剂盒,动物血制品,生化试剂盒等。实验代做服务:HE染色/特殊染色/技术服务、免疫组化实验服务、Western blotting实验服务、RT-PCR实验技术服务,QPCR(荧光定量PCR)、酶联免疫ELISA、生化测试、液相气相检测等。
硫磺素 S 是苯并噻唑类荧光染料,可特异性嵌入淀粉样纤维的交叉 β- 折叠结构;游离染料荧光弱,结合淀粉样蛋白聚集物后荧光显著增强,荧光显微镜下呈黄绿色荧光。科研组织切片常用于标记 Aβ 淀粉样斑块、神经原纤维缠结,评估组织内淀粉样沉积的分布与面积,是阿尔茨海默病等蛋白聚集类模型的经典组织学检测方法。
实验原理(仅供参考):
硫磺素 S 为荧光探针,游离状态分子旋转不受限,荧光发生淬灭;当其嵌入淀粉样纤维的交叉 β- 折叠片层结构,分子旋转被约束,荧光恢复增强,可原位标记组织切片中淀粉样蛋白沉积,用于荧光显微镜定性与半定量分析。
操作步骤:
1)组织切片脱蜡后,洗涤 5min/3次。
2) 画圈,染DAPI,8分钟。
3)硫磺素S用50%酒精配置到浓度为0.3%。
4)室温孵育8min。
5)80%酒精洗涤10秒钟, 滴染10s,两次。最后纯水冲洗一次。
6)封片。
7)荧光显微镜观察。
注意事项:
1、实验全程避光操作,染料及染色后切片易发生荧光淬灭。
2、脱蜡需充分,避免非特异性背景染色;染色时间严格把控,防止过染。
3、乙醇漂洗步骤应轻柔,洗去游离染料,减少背景干扰。
4、切片封片建议选用无自发荧光的水溶性封片剂。染色完成后尽快镜检或低温避光保存。同时设置阴性对照,区分非特异荧光信号,保证淀粉样沉积检测结果可靠。
送样运输要求:
1.样本放置于20倍样本体积的固定液中固定24h以上,常温运输送样。切勿固定时间过长,切勿冷冻结冰。
2.石蜡切片常温运输,冰冻切片-20℃运输。