0.4%台盼蓝染色液染色原理

0.4%台盼蓝染色液染色原理

信帆生物主营产品: 质控样品，干扰物质，抗体抗原，elisa试剂盒，动物血制品，生化试剂盒等。实验代做服务：HE染色/特殊染色/技术服务、免疫组化实验服务、Western blotting实验服务、RT-PCR实验技术服务,QPCR(荧光定量PCR）、酶联免疫ELISA、生化测试、液相气相检测等。

产品名称：0.4%台盼蓝染色液（Trypan Blue Solution）

产品规格：50ml

有效期：9个月

保存方式：2-8℃冷藏

性状：深蓝色 

产品简介：本产品是细胞生物学实验中常用的活体染色试剂，核心用于细胞存活率检测与活细胞、死细胞鉴别。试剂配比稳定、染色效果均匀，适配常规哺乳动物细胞、肿瘤细胞、原代细胞等多种细胞样本，广泛应用于细胞培养、细胞计数、药物毒性检测、细胞凋亡初步筛查等实验场景。 

染色原理：活细胞的细胞膜结构完整、通透性正常，可有效排斥台盼蓝大分子染料，无法被染色，保持透明无色状态；死亡细胞或受损细胞的细胞膜破损、通透性丧失，台盼蓝染料可穿透细胞膜进入胞内，使细胞质被染成均匀的蓝色。通过显微镜观察染色状态，可快速区分活细胞与死细胞，并精准计算细胞存活率。

操作步骤(仅供参考):

1、收集细胞：如贴壁细胞：添加胰蛋-白酶 - EDTA 溶液消化，消化完成后收集细胞；

悬浮细胞：无需消化，直接进行收集；全部收集后的细胞于 1000～2000g 条件下离心 1 min，弃去上清，使用 1 mL PBS 重悬沉淀细胞。

2、台盼蓝染色:吸取 100μl 细胞悬液到1.5ml 或0.5ml 离心管内，加入100μl Trypan BlueStain(0.4%)轻轻混匀，静置染色3min(染色时间可适当延长，但不宜超过10min)。

3、细胞计数：吸取经过染色后的细胞，用血细胞计数板计数。通常如果要比较精确地进行定量，每个细胞样品至少需要数500个细胞，数出蓝色细胞和细胞总数。

细胞存活率计算公式如下：

细胞存活率=(细胞总数-蓝色细胞数）/细胞总数×100% 

适用范围

主要用于悬浮细胞、贴壁消化后单细胞悬液的活死细胞鉴别及存活率统计，适用于细胞培养质量检测、药物细胞毒性实验、细胞冻存复苏活性检测、流式细胞术前样本初筛等常规细胞生物学实验，不适用于固定后细胞染色。 

注意事项

1、本试剂仅用于科研实验，严禁用于临床诊断、人体及动物体内实验、食品及医药加工等场景。

2、台盼蓝具有一定毒性与潜在致癌性，操作时必须佩戴一次性手套、口罩，避免皮肤直接接触、口鼻吸入，严禁误食；若不慎接触皮肤，立即用大量清水冲洗。

3、注意凋亡小体偶尔也有台盼蓝拒染现象。

4、试剂开封后请尽快使用，以防影响后续实验效果。

5、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

6、开启试剂后及时密封，避免污染、光照氧化，长期室温放置会导致染料失效、染色效果变差。

7、实验所用离心管、计数板、枪头等耗材需保证无菌洁净，避免杂菌污染样本，影响实验结果。

8、废弃染液、染色后细胞样本需按照实验室生物安全废弃物规范处理，不可随意倾倒。