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信帆生物提供:蛋白定量实验技术服务

点击次数:13     更新时间:2026-09-23

信帆生物提供:蛋白定量实验技术服务

信帆生物主营产品: 质控样品,干扰物质,抗体抗原,elisa试剂盒,动物血制品,生化试剂盒等。实验代做服务:HE染色/特殊染色/技术服务、免疫组化实验服务、Western blotting实验服务、RT-PCR实验技术服务,QPCR(荧光定量PCR)、酶联免疫ELISA、生化测试、液相气相检测等。

蛋白定量实验是生物实验中测定样品总蛋白质含量的常用技术。它利用蛋白质与特定试剂发生显色反应,溶液吸光度与蛋白浓度呈线性关系,借助分光光度计检测,对照标准蛋白曲线计算样品蛋白浓度。常见方法有 BCA、Bradford、Lowry 等,各有不同的试剂干扰耐受范围。该实验是 WB、酶活检测等下游实验的基础,用于统一上样量,保障后续实验结果的可比性与可靠性。 

 

检验原理(仅供参考):

基于蛋白质与显色试剂发生特异性结合,生成有色复合物。在一定浓度范围内,复合物在特定波长下的吸光度与蛋白浓度符合朗伯 - 比尔定律。通过测定系列已知浓度标准蛋白的吸光度绘制标准曲线,再检测待测样品吸光度,代入曲线即可计算样品蛋白浓度。不同方法显色机制不同:Bradford 依靠考马斯亮蓝结合蛋白变色;BCA 则利用蛋白还原铜离子产生显色产物。

 

实验流程(具体步骤以说明书为准):

1、配制梯度浓度蛋白标准品,准备待测蛋白样品,做好标记。

2、按说明书配制定量工作液(BCA/Bradford)。

3、将标准品、待测样品分别加入微孔板 / 离心管,再加入工作液混匀。

4、恒温孵育,充分发生显色反应。

5、酶标仪 / 分光光度计测定对应波长吸光度值。

6、根据标准品吸光度绘制标准曲线,计算待测样品蛋白浓度。

7、记录数据,校正样品稀释倍数,得到最终蛋白含量。

  

送样运输要求:

1、血清样本(干冰运输)

全血标本请于室温放置2小时或4℃过夜(GLU检测请勿全血样本放置过夜取血清)后于2-8℃ 3000转/分离心15min,取上清即可立即检测;或进行分装,并将标本放于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。解冻后的样本应再次离心,然后检测。

2、血浆样本(干冰运输)

可用肝素作为抗凝剂,标本采集后30分钟内于2-8℃3000转/分离心15min,取上清即可立即检测;或进行分装,并将标本放于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。解冻后的样本应再次离心,然后检测。


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