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ELISA实验代测之ELISA实验样本的收集方法-上海信帆

更新时间:2016-07-18   点击次数:1067次

ELISA实验代测之ELISA实验样本的收集方法-上海信帆。本公司供应ELISA试剂盒,提供ELISA实验代测服务,欢迎大家!

在收集样本前都必须有一个完整的计划,必须清楚要检测的成份是否足够稳定。对收集后
当天就进行检测的样本,及时储存在4℃备用。对于隔天再检测的样本,及时分装后冻存在-
20℃备用,有条件的,-70℃冻存备用。标本应避免反复冻融。
液体类标本: 包括血清、血浆、尿液、胸腹水、脑脊液、细胞培养上清等。
1. 血清:室温血液自然凝固10-20 分钟,离心20 分钟左右(2000-3000 转/分)。仔细收集
上清,保存过程中如出现沉淀,应再次离心。
2. 血浆:应根据标本的要求选择EDTA、柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂,混合10-20 分钟后,离
心20 分钟左右(2000-3000 转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应该再
次离心。
3. 尿液:用无菌管收集,离心20 分钟左右(2000-3000 转/分)。仔细收集上清,保存过程
中如有沉淀形成,应再次离心。胸腹水、脑脊液参照此实行。
4. 细胞培养上清:检测分泌性的成份时,用无菌管收集。离心20 分钟左右(2000-3000 转/
分)。仔细收集上清。
5. 培养细胞:检测细胞内的成份时,用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100
万/ml 左右。通过反复冻融或加入组织蛋白萃取试剂,以使细胞破坏并放出细胞内成份。
离心20 分钟左右(2000-3000 转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再
次离心。
6. 组织标本:切割标本后,称取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。
标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS(PH7.4),或组织蛋白萃取试剂,
用手工或匀浆器将标本匀浆化。离心20 分钟左右(2000-3000 转/分)。仔细收集上清。
分装后一份待检测,其余冷冻备用。
7. 标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进
行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融.
8. 不能检测含NaN3 的样品,因NaN3 抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。

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