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信帆生物为您提供:人前列腺素E2试剂盒的操作原理及样本处理方法

更新时间:2018-05-14   点击次数:1174次

信帆生物为您提供:人前列腺素E2试剂盒的操作原理及样本处理方法!上海信帆生物代理销售人前列腺素E2(PGE2)elisa试剂盒,受到很多客户的*,提供技术指导和售后服务,欢迎大家!

前列腺素的生理作用
(1)对生殖系统作用:作用于下丘脑的黄体生成素释放激素的神经内分泌细胞,增加黄体生成素释放激素的释放,再刺激垂体前叶黄体生成素和卵泡刺激素分泌,从而使激素分泌增加。前列腺素也能直接刺激间质细胞分泌。可增加大鼠重量、核糖核酸含量、透明质酸酶活性和精数量,增加精活动。前列腺素维持雄性生殖器官平滑肌收缩,被认为与精作用有关。精中PG使子宫颈肌松弛,促进精在雌性动物生殖道中运行,有利于受精。但大量前列腺素,对雄性生殖机能却有抑制作用。
(2)对血管和支气管平滑肌的作用:不同的前列腺素对血管平滑肌和支气管平滑肌的作用效应不同。前列腺素E和前列腺素F能使血管平滑肌松弛,从而减少血流的外周阻力,降低血压。
(3)对胃肠道的作用:可引起平滑肌收缩,抑制胃酸分泌,防止强酸、强碱、*等对胃粘膜侵蚀,具有细胞保护作用。对小肠、结肠、胰腺等也具保护作用。还可刺激肠液分泌、肝胆汁分泌,以及胆囊肌收缩等。
(4)对神经系统作用:前列腺素广泛分布于神经系统,对神经传递质的释放和活动起调节作用,也有人认为,前列腺素本身即有神经传递质作用。
(5)对呼吸系统作用:前列腺素E2和I2有松弛支气管平滑肌作用,而前列腺素F2α则相反,是支气管收缩剂。
(6)对内分泌系统的作用:通过影响内分泌细胞内环腺苷酸(CAMP)高低水平,来影响激素的合成与释放。如促使素分泌和肾上腺皮质激素的合成。也通过降低靶器官的CAMP水平,而使激素作用降低。

信帆生物为您提供:人前列腺素E2试剂盒的操作原理及样本处理方法!操作原理:

本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人前列腺素E2(PGE2)水平。用纯化的人前列腺素E2(PGE2)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中 依次加入前列腺素E2(PGE2),再与 HRP 标记的前列腺素E2(PGE2)抗 体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过*洗涤后加底物 TMB 显色。TMB 在 HRP 酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成zui终的黄色。颜色的深浅和样品中的前列腺素E2(PGE2)呈正相关。用酶标仪在 450nm 波长下测定吸光度(OD 值),通过标 准曲线计算样品中人前列腺素E2(PGE2)浓度。

试剂盒样本处理方法:

在收集样本前都必须有一个完整的计划,必须清楚要检测的成份是否足够稳定。对收集后当天就进行检测的样本,及时储存在4℃备用。对于隔天再检测的样本,及时分装后冻存在-20℃备用,有条件的,好-70℃冻存备用。标本应避免反复冻融。

液体类标本包括血清、血浆、尿液、胸腹水、脑脊液、细胞培养上清等。

血清:室温血液自然凝固10-20分钟,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如出现沉淀,应再次离心。
血浆:应根据标本的要求选择EDTA、柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应该再次离心。
尿液:用无菌管收集,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。胸腹水、脑脊液参照此实行。
细胞培养上清:检测分泌性的成份时,用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。
培养细胞:检测细胞内的成份时,用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融或加入组织蛋白萃取试剂,以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
组织标本:切割标本后,称取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS(PH7.4),或组织蛋白萃取试剂,用手工或匀浆器将标本匀浆化。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。分装后一份待检测,其余冷冻备用。
标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融.
不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。

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