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抗酒石酸酸性磷酸酶的相关知识

发布时间:2019-05-10   点击次数:37次

   抗酒石酸酸性磷酸酶(tartrate resistant acid phosphatase , TRACP) 为最近发现的骨吸收和破骨细胞活性的良好标志物, 测定血清中TRACP 尤其是TRACP-5b 的浓度, 有助于了解生理条件和各种病理条件下的骨代谢状况。
   抗酒石酸酸性磷酸酶缺乏和过度表达的大鼠模型分别表现为骨硬化和骨质疏松。骨吸收时, 破骨细胞附着在骨的表面, 分泌的酸和蛋白酶在骨基质与破骨细胞之间形成一个空隙, 磷酸酐酶和H + - ATP 酶质子泵形成一个酸性环境, 位于破骨细胞微粒体TRACP ,即通过破骨细胞波状缘分泌进入此空隙, 与其他酶一起参与骨基质中固体钙磷矿化物的降解。
 骨细胞TRACP 具有细胞特异性,分泌呈激素应答模式并有复杂的调节机制。甲状旁腺激素能刺激破骨细胞分泌TRACP; 降钙素可有效抑制其分泌; 细胞外高浓度的钙离子可负反馈调节TRACP 的分泌; TRACP 的有效非竞争性抑制剂钼酸盐可使TRACP 导致的骨吸收面积减小。在破骨细胞内, 环磷酸腺苷(cAMP) 、细胞内钙和鸟苷酸结合蛋白(G蛋白) 也参与TRACP 的调节。
  抗酒石酸酸性磷酸酶的最适PH 为4.9~6.0 , 等电点在8.5~9.0 ,对非特异性酸性磷酸酶和碱性磷酸酶所共用的多种磷酸酯底物显示较低的专一性, 可以水解广泛存在于自然界和合成的各种磷酸酯, 也能水解无机焦磷酸盐。大多数TRACP 可被巯基化合物、亚铁离子、酒石酸盐等激活。
 
  抗酒石酸酸性磷酸酶染色液主要用于细胞和组织的抗酒石酸酸性磷酸酶染色。主要由萘酚、六氮化对品红、亚硝酸钠等组成,染色后酶活性部位呈红色。
实验流程:
  制备切片/细胞爬片→TRACP染色液孵育→苏木素复染→封片、观察拍照

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