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操作明胶酶谱试剂盒的时候特别重要的一步是什么

更新时间:2019-06-19   点击次数:854次

操作明胶酶谱试剂盒的时候特别重要的一步是什么?

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很多老师在使用明胶酶谱试剂盒的时候电泳总是跑不好,要么是时间很短,要么是跑不开等,今天我们把跑电泳的几个注意事项分享给大家。

1、跑电泳的时候,每一块小胶电流为20 mA/gel,如果您跑2块,增加到30mA左右,胶的数量增加,电流也需要增加,一般需要跑3-6小时,慢慢压。

2、恒流了 电压就是自动的了

3、明胶跑的蛋白是非变性的

4、配的下层胶孔径稍大

5、跑的时候多跑会儿,条带之间拉得开些,为作图时给各条带添加文字留出足够的空间。

 

做明胶酶谱法实验的其他注意事项:

1.制备聚丙烯酰胺时应注意排除气泡。

2.明胶酶谱的活性受钙离子,锌离子,和PH值等因素的影响,因此缓冲液配制应严格准确,尽量用超纯水,孵育温度也掌握好。

3.用大梳子

4.孵育液的PH在7.5-7.6,复性的TRITON时间长了会有絮状物,所以实验时尽量使用新鲜配置的。

5.孵育的37度不要在CO2培养箱中,因为会改变孵育液的PH值,在普通孵箱即可。

精华篇:明胶酶谱分析试剂盒跑电泳的时候有什么注意事项

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