放射免疫方法检测透明质酸A的含量-上海信帆生物

透明质酸A在大多数情况下都是选择用放射免疫的方法来检测，包括上也经常选择使用放免的方法来测透明质酸A，那么放免的原理具体是什么，检测灵敏度是多少？上海信帆为您答疑解惑？

透明质酸（Hyaluronic Acid, HA）是一种广泛存在于细胞外基质中的高分子多糖，主要由肝内皮细胞进行降解。肝组织正常结构受到损伤时，一方面 HA 的合成增加，另一方面肝脏对 HA 的降解能力下降，导致血清中 HA 水平明显增高，并且增高的程度与肝组织炎症及纤维化程度呈正相关。

急性肝炎、慢性活动性肝炎、肝硬化以及肝癌都导致血清 HA 水平增高，某些恶性肿瘤、肺心病患者的血清 HA 水平也会增高。慢性肝炎在用干扰素或激素进行治疗时，伴有血清 HA 水平下调。胚胎儿血清 HA *，新生儿血清 HA 仍维持在较高水平，随着年龄增长血清 HA 逐渐降低，到中、老年又略有升高。

血清 HA 水平是反映肝纤维化的重要指标，也可用于抗纤维化药物治疗时的动态观察。

本方法采用竞争放射免疫分析法，即标准或待测样品中的 HA 和¹²⁵I-HA 共同与*的透明质酸结合蛋白（Hyaluronic Acid BindingProtein, HABP）在适宜的条件下进行竞争性结合反应。一部分 ¹²⁵I-HA125与 HABP 结合形成复合物，而另一部分呈游离状态。 I-HA 与 HABP

结合的比例取决于标准或待测样品中非标记 HA 的含量，非标记 HA的含量越高，¹²⁵I-HA 与 HABP 形成的复合物越少。HA-HABP 复合物与 HABP 抗体和第二抗体形成交联的聚合物沉淀下来，测定沉淀物的放射性计数。经过适当的数据处理后可获得标准曲线，从标准曲线

上查出被测样品的 HA 含量（数据可由计算机自动处理）。

【适用仪器】

适用于各类γ-放射免疫分析仪。

【血样处理】

取静脉血分离血清，48 小时内测量可在 2~8℃密闭保存；超过 48

小时-20℃密闭冷冻保存，至少稳定 2 个月，但要避免反复冻融。

【本药盒的主要技术指标 】

1. 测定范围：25~800ng/ml；

2. 灵敏度：5.5ng/ml；

3. 精密度：批内变异 CV<10%；批间变异 CV<15%。

【注意事项】收到药盒后尽快存放在 2-8℃保存，使用前应平衡至室

温，加试剂前必须摇匀。

1. 操作前请仔细阅读说明书，不同批号的试剂不得混用。

2. 加样操作应快速准确手法一致，尽量缩短整个加样时间。一

批测定中管数不宜过多，以加入 HABP 前后管相差在 5 分钟

内为宜，严格控制每步反应的时间和温度。

3. 加样头不可混用，以免交叉污染。

4. 加标准品、质控或样品时注意将样本加到试管底部；加标记

物时加样头不要碰到液面；加抗体时加样头应在液面之上约

1cm 以免交叉污染。

5. 温浴之前应充分混合均匀

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