信帆生物销售抗坏血酸氧化酶（ascorbate oxidase，AAO）*

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测定意义：
AAO是定位于植物细胞壁的糖蛋白，属“蓝铜氧化酶”家族。细胞壁内的抗坏血酸和AAO与细胞壁的代谢和生长有着密切的关系。AAO 氧化 AsA 所形成的 MDHA 可通过质膜上的细胞色素b还原，该过程中电子的跨膜运输能够促进细胞生长。
测定原理：
AAO可直接氧化AsA，通过测定AsA的氧化量，可计算得AAO活力。
实验中所需仪器及设备：
低温离心机、紫外分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96孔板、可调式移液器、研钵、冰、蒸馏水。
试剂组成和配制：
试剂一：液体×1瓶，4℃保存。
试剂二：液体×1瓶，4℃保存。
试剂三：粉剂×1瓶，4℃保存。临用前加入2mL蒸馏水充分溶解。
粗酶液提取：
称取约0.1g样品，加试剂一1 mL，冰上充分研磨，16000 g 4℃离心20min，取上清液待测。
AAO测定操作：
1. 分光光度计预热30 min，调节波长到265 nm。
2. 试剂二在25℃水浴锅中预热30 min。
3. 空白管：依次在微量石英比色皿/96孔板中加入20μL蒸馏水、170μL预热的试剂二和10μL试剂三，迅速混匀后在265nm测定10s和130s光吸收。
4.4. 测定管：依次在微量石英比色皿/96孔板中加入20μL上清液、170μL预热的试剂二和10μL试剂三，迅速混匀后在265nm测定10s和130s光吸收。

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