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小鼠转化生长因子β1(TGF-β1)ELISA检测试剂盒使用说明!

更新时间:2021-08-20   点击次数:487次

小鼠转化生长因子β1(TGF-β1)ELISA检测试剂盒使用说明!

检测原理:

试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被小鼠转化生长因子β1(TGF-β1)捕获抗体的包被微孔中,依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体,经过温育并*洗涤。用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成终的黄色。颜色的深浅和样品中的小鼠转化生长因子β1(TGF-β1)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD 值),计算样品浓度。

操作步骤:

  1.   从室温平衡60min后的铝箔袋中取出所需板条,剩余板条用自封袋密封放回4℃。
    2.  设置标准品孔和样本孔,标准品孔各加不同浓度的标准品50μL;
    3.  待测样本孔先加待测样本10μL,再加样本稀释液40μL;
    4.  随后标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的检测抗体100μL,用封板膜封住反应孔,37℃水浴锅或恒温箱温育60min。
    5.  弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液,静置1min,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复洗板5次(也可用洗板机洗板)。
    6.  每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
    7.  每孔加入终止液50μL,15min内,在450nm波长处测定各孔的OD值。


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