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中性转化酶(Neutral invertase, NI)的检测原理!

更新时间:2021-09-06   点击次数:629次

中性转化酶(Neutral invertase, NI)的检测原理!

蔗糖转化酶(InvertaseIvr)催化蔗糖不可逆地分解为果糖和葡萄糖,是高等植物蔗糖代谢关键酶之一。根据适 pH,将高等植物Ivr分为酸性转化酶(AI)和中性转化酶(NI)两种类型。NI主要存在于细胞质中,负责分解细胞质中蔗糖为果糖和葡萄糖。

检测原理:

NI催化蔗糖分解产生还原糖,进一步与3,5-二硝基水杨酸反应,生成棕红色氨基化合物,在510nm有特征光吸收,在一定范围内510nm光吸收值与还原糖生成量成正比。通过光吸收增加速率来计算NI活性

实验所需设备:

可见分光光度计/酶标仪、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研钵、冰蒸馏水

试剂组成和配制:

提取液:液体100mL×1瓶,4℃保存;

试剂一:液体20mL×1瓶,4℃保存;

试剂二:粉剂×1瓶,4℃保存;临用前加入20mL试剂一充分溶解备用;

试剂三:液体15mL×1瓶,4℃保存;

生物试剂的使用常识:

(1)试剂切忌与手接触(有些试剂有强腐蚀性、等特性)。

(2)要用洁净的药勺,量筒或滴管取用试剂,绝对不允许用同一种工具同时连续取用多种试剂。取完一种试剂后,应将工具洗净(药勺要擦干)后,才可取用另一种试剂。

(3)试剂取用后一定要将瓶塞盖紧,不可放错瓶盖和滴管,绝不允许张冠李戴,用完后请及时将瓶放回原处,以免遗忘,带来不便。

(4)已取出的试剂不能再放回原试剂瓶内(怕产生原试剂的再次污染)。

本产品仅供科研实验用,不做其它用途!现货供应,欢迎广大用户前来咨询!








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