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总抗氧化能力试剂盒说明书

点击次数:1202 发布时间:2019/8/12
提 供 商: 上海信帆生物科技有限公司 资料大小:
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总抗氧化能力(Total antioxidant capacity ,T-AOC)
试剂盒说明书
总抗氧化能力(Total antioxidant capacity ,T-AOC)
试剂盒说明书
可见分光光度法
注意:正式测定之前选择 2-3 个预期差异大的样本做预测定。
可见分光光度法
注意:正式测定之前选择 2-3 个预期差异大的样本做预测定。
测定意义
测定对象中各种抗氧化物质和抗氧化酶等构成总抗氧化水平。在生物学、医学和药学研究
中常常检测血浆、血清、唾液、尿液等各种体液,细胞或组织等裂解液、植物或中草药抽提液
及各种抗氧化物(antioxidant)溶液的总抗氧化能力。
测定原理
在酸性环境下,物质还原 Fe
3+ -三吡啶三吖嗪(Fe 3+ -TPTZ)产生蓝色的 Fe 2+ -TPTZ 的能力反映
了其总抗氧化能力。
自备实验用品
可见分光光度计、恒温水浴锅、低温离心机、1mL 玻璃比色皿和蒸馏水。
试剂组成和配制
提取液:液体 60mL×1 瓶,使用前预冷。
试剂一:液体 50mL×1 瓶,避光保存。
试剂二:液体 5mL×1 瓶,4℃避光保存。
试剂三:液体 5mL×1 瓶,避光保存。
样品的制备
(1) 血清、血浆、唾液或尿液样品
血浆(制备时可以使用肝素或柠檬酸钠抗凝,不宜使用 EDTA 抗凝)4℃,5000rpm 离心
10min,取上清待测。血清、唾液或尿液样品直接用于测定,也可以-80℃冻存(不宜超 30 d)
后再测定。
(2) 组织样品
按照组织质量(g):提取液体积(mL)为 1:5~10 的比例(建议称取约 0.1g 组织,加入
1mL 提取液)进行冰浴匀浆,然后 10000g,4℃离心 10min,取上清,置冰上待测。
(3) 细胞样品
按照细胞数量(10
4 个):提取液体积(mL)为 500~1000:1 的比例(建议 500 万细胞
加入 1mL 提取液),冰浴超声波破碎(功率 200W,超声 3s,间隔 10s,重复 30 次);10000g,
4℃离心 10min,取上清,置冰上待测。
操作步骤
混合液(现配现用):将试剂一、试剂二、试剂三按 10:1:1 的比例混合,使用前预温至 37℃ 。
空白管 测定管
混合液(μL) 900 900
样品(μL) 30
双蒸水(μL) 120 90
充分混匀,反应 10min,双蒸水调零,1mL 玻璃比色皿,测定 593nm 处吸光值,△A= A 测定
-A 空白

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