纤维蛋白原（FIB）测定试剂盒（凝固法）

纤维蛋白原（FIB）测定试剂盒（冻干型）（凝固法）说明书

产品名称：纤维蛋白原（FIB）测定试剂盒（冻干型）（凝固法）

产品包装规格： 

需自备：  定值校准品

预期用途：用于科研实验中血浆中纤维蛋自原含量测定。
检测原理：采用Clauss凝固法原理，高浓度凝 血酶存在时，检测稀释血浆的凝固时间与其纤维蛋白原(FIB) 含量成反比关系。

主要组成成分：

                  注:不同批号试剂盒中各组分不可互换。

储存条件及有效期：未开启试剂于2～8℃保存，有效期12个月；凝 血酶试剂溶解后应密闭存储于2-8℃，可稳定7天，不可冷冻。缓冲液开瓶后可密闭储存2-8℃，稳定30天。

注：产品生产日期和有效期见外包装盒。
使用仪器：全自动/半自动血凝仪等

样本要求：
采集静脉血，立即与0.109molL枸橼 酸钠溶液按照9:1的比例充分混合均匀，以3000rpm离心10-15min，分离出上层贫血小板血浆。

血浆应在 2h内进行测定，如果不能在2h内完成检测，应将血浆低温保存(-20℃可保存2周，-70℃可保存6个月)。测定前将血浆于 37℃下快速融化

检验方法：
1. 试剂配制

冻干品凝 血酶试剂按照瓶签标示的装量，准确量取蒸馏水进行溶解，轻摇混匀后室温静置15分钟后即可使用。

2.操作程序

2.1半自动血凝仪操作程序

将血浆用凝血分析用缓冲液10倍稀释，并将配置好的凝 血酶试剂平衡至室温，然后按表1操作。

表1     FIB 测定操作步骤

2.2全自动血凝仪操作程序

按照全自动血凝仪操作步骤进行测定，稀释血浆及试剂用量可参考上表。

3.校准程序

3.1半自动血凝仪校准程序

按表2将标示有FIB含量的校准品（校准血浆）用凝血分析用缓冲液制备成不同的稀释度。取不同稀释度的血浆按表1进行测定，并分别记录不同稀释度血浆的凝固时间。

表2    校准的稀释方法

用双对数坐标图制作标准曲线，以校正血浆的含量为丫轴，以相对应的凝固时间为X轴，将4个点连成一条合适的直线。

3.2全自动血凝仪校准程序

按照全自动血凝仪定标步骤进行校准。

4.实验结果的计算

根据标准曲线，用血浆凝固时间换算出纤维蛋白原含量。如果凝固时间不在标准曲线范围内，重新稀释后再测定。若凝固时间长于30倍稀释点，可做5倍稀释后测定，换算出浓度后乘以0.5即为实际含量;若短于5倍稀释点，可作30倍稀释后测定，换算出浓度后结果乘以3即为实际含量。

【阳性判断值或者参考区间】

1.FIB 通常含量:2-4 g/L。

2.每个实验室应根据其自身情况、仪器及试剂系统确定本实验室的参考范围。

【检验结果的干扰因素及局限】

1. 此方法不适合肝素抗凝的样本。待测血浆中FDP含量超过100mg/L，或肝素含量超过0.6U/mL会影响纤维蛋白原的测定结果。

2.溶血的血浆可导致纤维蛋白原含量升高,因为红细胞成分具有促凝血作用。

3.纤维蛋白降解片段能抑制纤维蛋白的凝集,因此会延长凝固时间，产生假性纤维蛋白原低水平。

4.待测血样不可用EDTA-Na2、肝素、草酸盐作抗凝剂，应用0.109mol/L枸橼 酸钠溶液作抗凝剂.

【实验操作中注意事项】

1.本产品仅用于科研实验使用，不可用于临床检验。请穿戴好实验服,防护面罩和实验手套

2.应避免试剂误食或接触皮肤及粘膜。如试剂不慎 入眼，或接触人体，应用大量清水冲洗。

3.在检测过程中，所用的试管、移液管、注射器都应是塑料或硅化玻璃的。

4.抗凝剂与血样的比例为1:9，即抗凝剂1份，血样9份。

5.取血过程要快速完成，不可有凝血 块。

6.血样采集后应立即与抗凝剂混合，避免出现部分凝血的现象，动作应轻柔，避免剧烈振摇。 

若待测血样红细胞比积<0.20或>0.55时，需按下列公式调整血样与抗凝剂的比例:

抗凝剂用量(mL)=0.185x血量(mL)x(1-样本红细胞比积)

7.待测血样不可长时间暴露于空气中以致pH值升高，因此若不能立即检测应加塞保存。

8.待测血样应以 3000转/分离心 10~15min，获得贫血小板的血浆。

9.由于凝-血酶试剂和分析用缓冲液中含有防腐剂，如接触到下水道中的铅和铜可形成有害性物质重金属叠氮化物。因此将此类物质排放到下水道时，应用大量的水冲洗，最-大-程度地降低这种危险性。

10.请把样本当作可能感染HIV、HBV、HCV等的危险物质处置。为了避免检测时感染的危险，请务必做好实验防护，穿戴实验服、实验手套等。另外，请不要通过口来使用吸管进行移液。

11.所有废弃物的处理（包括用完的试剂瓶）,按照本单位及实验室法规的规定处理。