组织自发荧光淬灭试剂说明书

组织自发荧光淬灭试剂说明书

一、产品原理与特点

各类组织及细胞样本会产生内源自发荧光，该荧光可穿透多波段滤光片，干扰特异性荧光信号观察，严重时会直接造成免疫荧光染色实验失败。本试剂含专用离子组分，依靠分子碰撞捕获内源荧光分子的激发态电子，阻止电子回落基态释放荧光能量，以此消除样本背景自发荧光。合理控制孵育时长，可最大程度清除背景杂荧光，同时对抗体标记的特异性荧光损耗较低。

二、储存条件与适用样本

储存条件：2～8℃避光保存

适用样本：各类组织、细胞免疫荧光染色的自发荧光消除，推荐神经组织去除自发荧光使用。

三、标准操作步骤

提醒：本试剂必须在整套免疫荧光染色操作全部完成后再使用，染色前添加会大幅破坏特异性荧光信号。不同组织、细胞需摸索适配孵育时长，平衡背景淬灭效果与靶标荧光强度。

1. 吸弃样本表面PBS洗涤液，使用蒸馏水快速冲洗组织切片或培养板中的细胞；

2. 加入足量自发荧光淬灭试剂，完全覆盖样本，室温孵育10-90分钟；

3. 吸除试剂废液，蒸馏水短时冲洗样本；

4. 吸去蒸馏水，加入PBS浸润覆盖样本；

5. 封片：建议搭配抗荧光衰减封片剂使用，减缓特异性荧光信号衰退；

6. 放置荧光显微镜下观察成像。

四、注意事项

1. 不同物种、不同器官组织的内源荧光特性存在差异，试剂处理效果会略有区别。所有自发荧光淬灭处理都会轻微降低抗体标记荧光强度，但本试剂清除背景荧光的效果远高于靶标荧光损耗，可实现良好的信噪比。试剂对脑脊髓神经组织适配效果佳。

2. 孵育时间优化方案：正式实验前取多份相同切片或细胞样本，染色完成后分别设置5min、10min、30min、60min、90min梯度孵育，冲洗后镜检判断效果。 若样本背景自发荧光依旧明显，可延长孵育时长；若孵育不足10分钟就出现靶标荧光明显减弱，可缩短孵育至1-5分钟，也可将试剂与等体积纯水1:1稀释后，在10-90分钟区间重新摸索孵育条件。

3. 使用顺序要求：组织自发荧光淬灭试剂必须在完成免疫荧光组化染色后使用，否则将严重降低抗体荧光。

本产品仅供科研实验用，不做其他用途！