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RT-PCR定义:
是指对组织或细胞的总RNA进行抽提,把RNA反转录为cDNA,然后设计目的基因引物进行PCR,琼脂糖电泳并数码拍照,分析电泳条带灰度值,判断目的基因mRNA转录水平的相对量的变化。
RT-PCR流程简介
一、抽提RNA:
1、防止RNA酶污染
180℃的高温下干烤6hr以上;
0.1% DEPC水浸泡或用氯仿冲洗;
去污剂洗涤,双蒸水冲洗;
溶液皆用0.1% DEPC水配置,试剂应为新开封或RNA;
操作人员戴手套;
器械。