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HRP标记羊抗鸡IgY如何正确使用

发布时间:2020-05-29   点击次数:69次

HRP标记羊抗鸡IgY如何正确使用

HRP标记多克隆抗体是由山羊抗血清经亲和层析纯化而得到高纯度多克隆抗体。

一、试剂成分:

HRP* Polyclonal Goat Anti-Chicken Igy(IgG)H+L、50%甘油、PBS、稳定剂、保护剂。

二、使用方法:

ELISA法建议在1:4000-20000选择合适您实验的稀释比例,也可根据您试验的具体情况在此建议的稀释度范围之外合适的使用,高可稀释到数万仍有使用价值。稀释推荐使用含0.2-0.5%BSA和0.05% 吐温-20的0.01M的PBS(PH:7.0),也可使用其它正确的稀释用液,原则上配成的工作液要一次使用完,不得多次使用。如确实要多次使用请在配制时加入合适的防腐剂与稳定剂,并要求在2-8℃避光存放,但尽管如此也不要放置太久,以免对您的结果产生不良影响。因不良稀释用液和存放而造成的损失不在投诉范围。本品也可以用于免疫印记和免疫组化实验。

三、注意事项:

1、虽然本试剂在有效期过后很长一段时间仍可以使用,但还是强烈建议您在管体规定的有效期内正确使用。

2、请不要在脏乱和强光环境中取用,以免造成污染和失效。

3、如果一次使用很少可以将其适当分装后使用,这样可以有效的防止试剂污染。

4、本二抗酶对鸡其它Ig 有5-10%交叉性,也就是说跟IgM等类抗体也可以有一定反应性,实际应用良好。          

四、批号和有效期:

请查看管体标签。

五、保存条件:

-20℃避光保存。

六、包装规格:1ml。

七、产品浓度:1mg/ml

辣根过氧化物标记的步骤。

答:1.1 试剂准备
1) 10mg/mL HRP
2) 0.06mol/L NaIO4
3) 0.16mol/L乙二醇
4) 碳酸盐缓冲液(Na2CO3 0.7952g NaHCO3 1.4702g 溶于500mL蒸馏水中,调pH值到9.5)
5) 2.5mg/mL NaBH4
6) 0.01mol/L磷酸盐缓冲液,pH7.4
1.2 操作步骤
1. 10mg/mL取HRP VmL,溶液为棕黄色,加入0.06mol/L NaIO4 VmL,立刻变为灰绿色。静置30min,4℃
2.加入0.16mol/L乙二醇VmL,溶液变回棕黄色,RT,静置30min。
3.加入抗体Vml 5mg,CB,4℃透析过夜。
4.再加入5mg/mL NaBH4 VmL,加入后溶液有气泡产生。室温静置2h。
5. 50%饱和硫酸铵盐析一次,12000rpm,4℃离心30min。沉淀用5VmL 0.01mol/L PB重悬。装入透析袋。
6. 溶液在0.01mol/L PB,pH7.4中透析过夜。

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