甲胎蛋白(AFP)放免试剂盒供应-上海信帆生物

通用名：碘[125I]甲胎蛋白放射免疫分析药盒
汉语拼音：Dian [125I] Jiataidanbai Fangshemianyifenxi Yaohe
英文名：Iodine [125I] Alphafetoprotein Radioimmunoassay Kit
简称：碘[125I]- AFP 放免药盒
[使用目的]
用于人血清样本中甲胎蛋白(AFP)的定量测定
[试验原理]
血清中甲胎蛋白（AFP）的检测主要用于1、原发性肝细胞癌的诊断和监测。AFP 的测定
为原发性肝细胞癌的早期诊断和监测及肝癌流行病调查和理论研究提供了重要依据，是
用的肿瘤标志物之一。2.通过血清及羊水AFP 的检测对先天性胎儿畸形的早期诊断
有实用价值。
本品采用了第二抗体＋聚已二醇沉淀法放射免疫分析试验原理：含甲胎蛋白（AFP）的样
品和125I 标记的甲胎蛋白（AFP）与相应的抗体反应形成抗原抗体复合物。反应后加入二
抗及PEG，使免疫复合物沉淀，离心，测沉淀放射性计数。通过标准曲线得到样本中AFP
的浓度。
[试剂主要组成成分]
1. AFP 标准品：一套共7 瓶，以不含AFP 的人血清为基质，用时轻轻摇匀，2～8℃冷存。
AFP 标准品浓度
2.质控血清：三瓶，0.5 ml／瓶，2～8℃冷存。
3.抗AFP 血清： 蓝色溶液，2～8℃冷存。
4.125I-AFP 标记物： 红色溶液，2～8℃冷存。
5 分离剂：蓝色溶液，充分摇匀后使用，2～8℃冷存。
[仪器]
1、γ－计数器
2、低温离心机
3、恒温水浴箱
[样本要求]
110 微升人血清样本。
采静脉血5ml 于塑料试管中，静置使其凝固后，1500 转／分离心，取其上清液，放
A B C D E F G 单位
0 10 20 50 100 200 400 ng/mL
置玻璃瓶中。如果样本不立即使用，可在-18℃~-25℃储存6 个月。
严重溶血、高浓度的脂类、胆红素对测定结果有影响。
[实验方法]
1、将实验所需试剂及样本放置室温，平衡至少30 分钟以上才可进行操作；
2、取60X12mm 聚苯乙烯管进行编号，所有实验均做双管重复；
3、取每个浓度的标准品、质控血清和样本100μl 加入相应编号的试管中；
4、每管均各加入100μl 标记物工作液；
5、每管均各加入100μl 抗体工作液，充分混匀；
6、37℃温育3 小时；
7、每管均各加入500μl 分离剂后，充分混匀；
8、室温放置30 分钟后，离心3500 转／分，20 分钟后，吸去或倾倒掉上清液；
9、用γ-计数器测定每管1 分钟的放射性强度计数；
10、从标准曲线上读取样本及质控血清的浓度。
操作流程(Assay Procedure)

[实验过程中应注意]
1、γ-计数器本底计数应≤100CPM/分，效率应≥75％；
2、加入放射性标记物时，应做好防护、小心谨慎，以避免造成放射性污染；
3、如果某一个样本的测定值高于浓度的标准品浓度，用零标准品以1：2 或1：
4 的比例稀释样本后重新测试，测试结果乘以相应的稀释倍数。

[质量控制]
每次实验操作应至少采用两个浓度的质控血清进行质量控制，以确保每次实验测定结果
的可靠性。
1、质控血清的平均值应在允许范围内；
2、曲线方程应采用拟合方式；
3、重复样本的测定结果相差在15％以内。
如不能同时满足以上条件，则此次试验结果无效，全部试验需重新进行。

[测定结果的计算]
1、计算标准品（B~G）、质控品和样品与标准品A 的比值
2、剂量-反应曲线按“对数剂量-结合率对数”（Log(dose-Log(B/Bmax))数学模型或
四参数数学模型拟合，通过每个标准品的B/B0 和其浓度建立标准曲线；
3、从标准曲线上查出样本的浓度值，B/B0 不在标准曲线之内的样本及其浓度

[实验的局限性]
1、本品仅供体外诊断使用，只能用于人血清样本的测定而不能用于其他体液样本；
2、通过其它方法得到的AFP 值与本品测定结果不具有直接的可比性；

[产品性能指标]
1、灵敏度：
取药盒中校准试剂A 点（0 剂量）作20 平行管，求其均值X 及偏差SD，从剂量—反应
曲线上查出与X+2SD 相对应的剂量值，确定为本药盒的灵敏度（小检出值），为

1.28ng/mL。
2、精密度：
精密度是质量控制的基本参数，用批内变异系数和批间变异系数确定。要求批内变异系
数< 10% ，批间变异系数< 15% 。
B/B0×100 = 标准或样品(STD or Samples)(CPM)—NSB(CPM)
A 标准(STD)(CPM)—NSB(CPM)
×100
批内变异系数:指不同浓度的三个样品C1、C2、C3 同时分别进行多个复管一次测定中
的重复性，应小于10%。
C1 C2 C3
批内变异系数5.95% 6.43% 4.98%
批内变异系数均小于10%。
批间变异系数:指不同浓度的三个样品C1、C2、C3 在多次测定间的重复性，应小于15%。
C1 C2 C3
批间变异系数7.27% 6.45% 4.51%
批间变异系数均小于15%。
3、测定范围：
采用零标准品添加高浓度的AFP,确定本试剂盒的测定范围为0～800 ng/ml
[注意事项]
1、全部试剂应避光贮于2-8℃并在使用前应在室温下（17-27℃）平衡。
2、该产品在制备过程中所用的血清均经检测，他们对HBsAg、HIV 无反应。但即使这样也
不会保证对所有的传染性因素进行检测。由于没有一个明确的测试方法能*保证不会出现
HBsAg、HIV 或其他传染病毒，所以所有的产品包括来自人体的物质都应按良好的实验室规
范，按疾病预防和控制中心的有关规定要求进行预防。
3、样本浓度过高，在分析前用保温液稀释，结果乘以稀释倍数。
4、血清正常值，仅供参考，使用单位应建立自己实验室的正常值。
正常血清参考值＜20ng/ml

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