服务热线
13764793648
DPPH自由基清除率(检测服务)
服务介绍:
自由基清除率检测试剂盒(比色法)又称氮自由基清除能力检测试剂盒或氮自由基清除率检测试剂盒,其检测原理是DPPH自由基是一种较稳定的含氮自由基,含一个单电子,溶于乙醇后溶液呈紫色,在517nm下有强吸收,如果有其他物质提供一个电子与此单电子配对,溶液会褪色,褪色程度与接受电子的量呈正比,通过吸光度下降的程度来反应样品的氮自由基清除能力,主要用于检测血清、植物组织、抗氧化类食品、保健品及药品等样本。
背景介绍:
DPPH(2,2-联苯基-1-苦基肼基)自由基清除率是一种用于评估化合物或物质抗氧化能力的指标。DPPH是一种稳定的有机自由基,在溶液中呈现深紫色,并在517 nm波长处具有最大吸收峰。当具有抗氧化性的化合物与DPPH自由基接触时,它们会与DPPH发生氧化还原反应,导致DPPH的紫色逐渐褪去,即其吸光度降低。
操作步骤(仅供参考):
1、准备样品:
①植物样品:取新鲜植物样本,清洗干净,研钵研碎(粉碎),干燥箱烘干后过筛,称取0.05g样品,加入0.8ml氮自由基提取液,40℃水浴浸提30~60min,10000rpm离心10min,上清液待用,4℃保存备用(亦可参考相关资料提取方法提取)。
②血浆、血清和尿液样品:血浆(用肝素或枸橼-酸钠抗凝,不宜使用EDTA抗凝) 4℃ 5000rpm离心10min,取上清液待用;血清或尿液样品可直接测定。
③细胞样品:按每5×106个细胞加入0.8ml氮自由基提取液,超声破碎(功率200W,超声3s,间隔10s,重复30次),10000rpm离心10min,取上清液待用。
④果汁、葡萄酒等样品:按样品:氮自由基提取液=1:9的比例震荡混匀,10000rpm离心10min,上清液待用,4℃保存备用。
⑤ 高活性样品:如果样品中有效浓度较高,可用提取液进行恰当的稀释。
2、配制维生素C溶液:将一支10mg维生素C充分溶解于1ml氮自由基提取液中
3、配制Vc标准工作液:如需测线性关系,建议用氮自由基提取液将10mg/ml维生素C溶液稀释至20、15、10、8、6、4、2μg/ml的Vc标准工作液
4、 分光光度计开机预热30min,调节波长517nm(500~530nm亦可),无水乙醇调零。
5、DPPH加样:按照下表设置空白管、样本测定管、样本对照管、阳性对照管,溶液应按照顺序依次加入,混匀,室温避光静置30min。
加入物(ml) | 空白管 | 样本测定管 | 样本对照管 | 阳性对照管(标准管) |
氮自由基提取液 | 0.2 | — | — | — |
上清液 | — | 0.2 | 0.2 | — |
Vc标准工作液 | — | — | — | 0.2 |
无水乙醇 | 0.9 | 0.9 | 1.8 | 0.9 |
DPPH溶液 | 0.9 | 0.9 | — | 0.9 |
6、 OD值测定:将各管溶液依次加入到比色皿中,用分光光度计检测各管吸光度值,依次记为A0、A1、A2、A3。
实验结果:
全自动生化仪检测后导出结果,结果由EXCEL形式发送。
送样须知:
1.南京和上海地区的客户可提供上门取样服务,提前一天联系
2.外地客户可邮寄样本,样本运输应符合一般的生物学要求,密封加冰袋或者干冰运输
3.若细胞、血清、组织样本具有潜在的传染性或致病性,请务必提前告知
4.测试结束提供实验报告后,样本可以保留1个月,若需保留样本或者回收样本请提前告知。
备注:本公司对客户的项目的专有技术和资料(包括实验方案,测试结果,样本等)负有绝对保密的责任。
仅供科研实验用,不走其他用途!