DPPH自由基清除率（检测服务）

服务介绍：

自由基清除率检测试剂盒(比色法)又称氮自由基清除能力检测试剂盒或氮自由基清除率检测试剂盒，其检测原理是DPPH自由基是一种较稳定的含氮自由基，含一个单电子，溶于乙醇后溶液呈紫色，在517nm下有强吸收，如果有其他物质提供一个电子与此单电子配对，溶液会褪色，褪色程度与接受电子的量呈正比，通过吸光度下降的程度来反应样品的氮自由基清除能力，主要用于检测血清、植物组织、抗氧化类食品、保健品及药品等样本。

背景介绍：

DPPH（2,2-联苯基-1-苦基肼基）自由基清除率是一种用于评估化合物或物质抗氧化能力的指标。DPPH是一种稳定的有机自由基，在溶液中呈现深紫色，并在517 nm波长处具有最大吸收峰。当具有抗氧化性的化合物与DPPH自由基接触时，它们会与DPPH发生氧化还原反应，导致DPPH的紫色逐渐褪去，即其吸光度降低。

操作步骤（仅供参考）：

1、准备样品：

①植物样品：取新鲜植物样本，清洗干净，研钵研碎(粉碎)，干燥箱烘干后过筛，称取0.05g样品，加入0.8ml氮自由基提取液，40℃水浴浸提30~60min，10000rpm离心10min，上清液待用，4℃保存备用(亦可参考相关资料提取方法提取)。

②血浆、血清和尿液样品：血浆(用肝素或枸橼-酸钠抗凝，不宜使用EDTA抗凝) 4℃ 5000rpm离心10min，取上清液待用；血清或尿液样品可直接测定。

③细胞样品：按每5×106个细胞加入0.8ml氮自由基提取液，超声破碎(功率200W，超声3s，间隔10s，重复30次)，10000rpm离心10min，取上清液待用。

④果汁、葡萄酒等样品：按样品：氮自由基提取液=1：9的比例震荡混匀，10000rpm离心10min，上清液待用，4℃保存备用。

⑤    高活性样品：如果样品中有效浓度较高，可用提取液进行恰当的稀释。

   2、配制维生素C溶液：将一支10mg维生素C充分溶解于1ml氮自由基提取液中

   3、配制Vc标准工作液：如需测线性关系，建议用氮自由基提取液将10mg/ml维生素C溶液稀释至20、15、10、8、6、4、2μg/ml的Vc标准工作液

    4、 分光光度计开机预热30min，调节波长517nm(500~530nm亦可)，无水乙醇调零。

    5、DPPH加样：按照下表设置空白管、样本测定管、样本对照管、阳性对照管，溶液应按照顺序依次加入，混匀，室温避光静置30min。

6、 OD值测定：将各管溶液依次加入到比色皿中，用分光光度计检测各管吸光度值，依次记为A0、A1、A2、A3。

实验结果：

全自动生化仪检测后导出结果，结果由EXCEL形式发送。

送样须知：

1.南京和上海地区的客户可提供上门取样服务，提前一天联系

2.外地客户可邮寄样本，样本运输应符合一般的生物学要求，密封加冰袋或者干冰运输

3.若细胞、血清、组织样本具有潜在的传染性或致病性，请务必提前告知

4.测试结束提供实验报告后，样本可以保留1个月，若需保留样本或者回收样本请提前告知。

备注：本公司对客户的项目的专有技术和资料（包括实验方案，测试结果，样本等）负有绝对保密的责任。

仅供科研实验用，不走其他用途！