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琥珀酸脱氢酶(SDH)测试盒 生化试剂

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琥珀酸脱氢酶(SDH)测试盒,催化底物反应,FAD 是该反应的辅基,FAD 被还原成 FADH,该反应与 2,6- DPIP的还原相偶联,测定 2,6-DPIP 的还原速度可以推算出SDH 的活力。

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琥珀酸脱氢酶(SDH)测试盒

50T/48 样)

一、测定原理:

琥珀酸脱氢酶(SDH)催化底物反应,FAD 是该

反应的辅基,FAD 被还原成 FADH,该反应与 2,6- DPIP

的还原相偶联,测定 2,6-DPIP 的还原速度可以推算出

SDH 的活力。

二、试剂组成与配制:(50T/48 样)

试剂一:液体 60mL×2 瓶,4℃冷藏 3 个月;

试剂二:液体 6mL×1 瓶,避光 4℃冷藏 3 个月;

试剂三:液体 6mL×1 瓶,避光 4℃冷藏 3 个月;

试剂四:液体 6mL×2 瓶,避光 4℃冷藏 3 个月;

试剂五:液体 6mL×1 瓶,避光-20℃冷藏 3 个月,如需分

多次使用,建议老师将试剂五分装后冷冻保存,

避免多次的反复冻融;

试剂六:液体 6mL×1 瓶,4℃冷藏 3 个月。

工作液的配制:试剂一:试剂二:试剂三:试剂四:试剂五:

剂六=2 : 0.1 : 0.1 : 0.2 : 0.1 : 0.1 的比例进行配

,用多少配多少,现用现配,配好后一定要避光

三、操作步骤:

a、将可见分光光度计 600nm ,1cm 光径比色皿,以双蒸

水调零 (比色皿准备两只,一只用于调零,一只用于测

)

b、将工作液37℃预温 5 分钟以上。

c往相应编号的试管中加入 100μL 待测样本,用 5mL

液器吸取 2.6mL 工作液迅速冲入试管中,立即混匀并

计时。

d迅速倒入比色皿中在可见分光光度计 600nm 处比色,5

秒时读取吸光度值(A1值), 1 5 秒时再次测定吸

光度值(A2 值);

e求出 2 次吸光度差值(A=A1-A2)。

注意点:

①、工作液一定要避光保存,测定过程中工作液同样要

避光;

②、比色皿必须用自来水冲洗干净,再用双蒸水洗 2

3 次后,才能对下一个样本进行检测;

③、在比色皿中加完样后,下一步加试剂与按秒表需

同步;

④、在比色皿中加完试剂后,必须快速放入分光光度

计的比色槽中;

⑤、试剂二、试剂三、试剂四、试剂五必须避光冷藏;

⑥、配好的混合试剂在测定前必须预温。

 琥珀酸脱氢酶(SDH)测试盒

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