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PAS染色又称过碘酸雪夫染色,糖原染色。一般用来显示糖元和其它多糖物质。
实验原理:
过碘酸能使细胞内的多糖乙二醇基氧化成双醛基醛基进而与Schiff氏液反应,使无色品红变成紫红染料而附着于含糖的组织上,通过白光成像设备可观察到呈红色的阳性部位。
PAS染色说明:
1、细胞可做染色,贴壁细胞做爬片后染色,悬浮细胞做滴片后染色。
2、拍照倍数分100倍,200倍,400倍。正常情况下拍照是200倍3张,400倍3张。
3、全景扫描可看任意倍数。
染色实验步骤(仅供参考):
1、固定新鲜干燥的涂片用品5%乙醇固定10min,蒸馏水冲洗,待干;
2、如涂片需要消化,可加唾液或麦芽糖淀酶,置室温消化60min,然后用蒸馏水冲洗;
3、10g/L高碘酸氧化15~20min,蒸馏水冲洗,待干;
4、置雪夫染液中室温染色30~60min;
5、用亚硫酸溶液冲洗3次后,再用自来水冲洗2~3min,待干;
6、蒸馏水洗;
7、20g儿甲绿复染10~20min;
8、水洗,待干,镜检拍照。
注意事项:
1、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
2、试剂均应低温保存,临用前半小时取出恢复室温。
3、高碘酸处理温度以不高于20℃为宜,室温高时,处理时间可适当缩短。Schiff 染液染色时间可随温度调整,室温高可减少染色时间,冬季室温低,可延长至20分钟左右。第一次使用本试剂时建议先取1-2个样品做预实验。
4、第一次使用本试剂时建议先取1-2个样品做预实验。
PAS染色实验代测