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寨卡病毒重组抗原(Z58/Z66)标记抗体

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上海信帆生物供应寨卡病毒重组抗原(Z58/Z66)标记抗体,寨卡病毒(Zika Virus, ZIKV)是一种RNA病毒,属于黄病毒科中的黄病毒属,主要通过蚊子传播。近几年来,寨卡病毒在美洲地区爆发流行,感染人数达数百万之多,并且有蔓延到其它地区的趋势。

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上海信帆生物供应寨卡病毒重组抗原(Z58/Z66)标记抗体,寨卡病毒(Zika Virus, ZIKV)是一种RNA病毒,属于黄病毒科中的黄病毒属,主要通过蚊子传播。近几年来,寨卡病毒在美洲地区爆发流行,感染人数达数百万之多,并且有蔓延到其它地区的趋势。

寨卡病毒重组抗原

Z58

rAg

E.coli

包被/标记

酶免、发光、层析

Z66

rAg

E.coli

包被/标记

酶免、发光、层析

 

寨卡病毒(Zika Virus, ZIKV)是一种RNA病毒,属于黄病毒科中的黄病毒属,主要通过蚊子传播。近几年来,寨卡病毒在美洲地区爆发流行,感染人数达数百万之多,并且有蔓延到其它地区的趋势。临床分析显示,寨卡病毒感染与新生儿小头症及成人的格林巴列综合症高度相关。动物试验也证明寨卡病毒可感染脑神经组织,导致小头症及其它出生缺陷。因此,寨卡病毒对全球公共健康已经构成了严重威胁。但目前还没有商业化的疫苗来预防寨卡病毒感染。


为了开发寨卡病毒基因工程疫苗,硕士研究生屈攀科等在黄忠和金侠的共同指导下,利用果蝇S2表达系统制备了基于寨卡病毒包膜蛋白(E)的不同长度重组蛋白,进一步在小鼠模型上评价这些重组蛋白疫苗的免疫原性和抗病毒保护效果。研究结果显示,E蛋白的胞外区(称为E80)及其结构域III(称为EDIII)均可在S2系统中高效表达;E80和EDIII疫苗都能在小鼠中诱导抗原特异性的抗体和T细胞免疫应答;在自主研发的寨卡病毒感染小鼠模型中,E80免疫小鼠血清和EDIII免疫小鼠血清都具有显着的抗病毒保护效果。值得指出的是,在相同剂量的情况下,EDIII疫苗所诱导的中和抗体效价比E80疫苗所诱导的中和抗体效价更高,而且能够提供更强的保护作用。以上结果表明,S2细胞来源的EDIII是一个非常有前景的寨卡病毒基因工程疫苗原型,值得开展后续的临床前和临床研发。


建立检测非结构蛋白1(NS1)抗原的免疫层析胶体金试纸方法,用于寨卡病毒(ZIKV)感染的早期诊断。方法对已获得的5株人源抗ZIKV NS1的单克隆抗体(ZKns2E11、ZKns3G2、ZKns4B8、ZKns4F10、ZKns14G5)采用生物膜层光学干涉法进行竞争抑制实验,以得到它们在抗原结合位点的相互关系并根据抗体结合抗原表位的不同将其进行分类,又通过两两随机组合配对方法筛选出佳捕获抗体及包被抗体,制备成胶体金试纸。分别用重组NS1蛋白、感染ZIKV细胞培养上清液以及感染登革病毒(DENV)病人血清/血浆多种检测样品以获得准确的特异性和敏感性。其中病毒定量采用FFA(focus-forming assay)方法。结果在竞争抑制实验结果中,根据抗体与抗原结合的剩余结合率(<20%被认为强竞争关系即结合位点相似甚至相同,>60%被认为无竞争关系即位点不同),抗体大致分为两类,并通过两两配对筛选出2株结合位点不一致的佳配对抗体(ZKns2E11、ZKns3G2),终建立检测ZIKV NS1抗原胶体金试纸的快速诊断方法。在试纸敏感性分析中,ZIKV重组NS1蛋白为31.25 ng/mL时肉眼仍可观测到阳性条带的出现,以2×10~4FFU/mL的ZIKV病毒量感染细胞所释放的NS1蛋白仍可被检测到。试纸在其特异性上,无论是重组蛋白、感染病毒细胞培养上清液还是临床样本,与DENV均不交叉,表现出良好的特异性。

寨卡病毒重组抗原(Z58/Z66)标记抗体

 

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