RNATrip（总RNA提取试剂）

所有产品仅供科研使用，不能用于食用和医疗等

RNATrip(总RNA提取试剂)

RNA Trip成功避开各种商业RNA提取试剂盒的种种弊端，采用新的技术和工艺，在提取过程中既能有效裂解组织细胞，强烈抑制RNA酶活性，保护RNA免受降解，同时也能极为有效地分离去除DNA和蛋白质。RNAtrip使RNA分离如同提取质粒DNA一样简单可靠，可在30-60分钟内完成，获得*纯度的总RNA沉淀，可用于RT-PCR、Northern Blot、RNA酶保护、Poly(A) mRNA纯化、体外翻译等实验。

操作步骤：

1.         组织细胞破碎与裂解（请在冰上操作）

(1)      固体组织。按比例每50-100 mg组织加1 mL RNAtrip试剂进行组织匀浆裂解。

(2)      培养细胞。每5-10´10⁶个细胞加1 mL RNAtrip试剂裂解。

(3)      液体标本：如体液、尿液、全血。每100ml液体样品加1 mL RNAtrip裂解。

2.     将组织细胞裂解物转移到1.5 mL离心管，置冰上10分钟。

3.         加入0.2体积的氯反(0.2mL)，充分颠倒混匀，冰浴5 分钟，溶液分相。有时分相不明显，不影响提取。

4.         12,000 ´ g 4 ^oC离心10分钟，溶液分为两相。RNA在上层水相，下层为有机相，两相界面是一层薄膜其厚度与组织细胞类型和多少有关。小心吸出0.5mL上层水相转移到新离心管。

5.         加入等体积异丙醇(0.5mL)于上清液充分混匀。冰上孵育10 分钟沉淀RNA。

6.         12,000 ´ g，4 ^oC 离心10分钟。管底可见少许RNA沉淀。

7.         弃上清。立即加入1 mL 用DEPC水配制的75%乙醇，颠倒混匀数次洗涤沉淀。12,000 ´ g离心5分钟。弃上清，尽量*吸去管壁上的液体。

8.         敞开管口空气干燥5-10分钟使残留液体挥发，略微干燥RNA沉淀即可。用50-100 ml自备的DEPC处理的高压消毒纯水或TE溶解沉淀。RNA溶液可保存于－70 ^oC或液氮中。

RNATrip(总RNA提取试剂)