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产品名称:人花生四烯酸(AA)ELISA检测试剂盒
货号:XTY16048
规格:48T/96T
储存条件:2-8℃
有效期:6个月
用途:仅供科研使用,定量检测血清、血浆、细胞培养上清液中花生四烯酸(AA)的浓度。
【检验原理】
本试剂盒采用竞争法酶联免疫吸附试验(ELISA)。在预包被抗花生四烯酸(AA)抗体(固相抗体)的微孔酶标板中,加入人 花生四烯酸(AA)校准品和待测样本,再加入HRP标记的人 花生四烯酸(AA)抗原(酶标抗原),经过温育与充分洗涤,去除未结合的组分,在微孔板固相表面形成固相抗体-酶标抗原的免疫复合物。加底物A和B,底物在HRP催化下,产生蓝色产物,在终止液(不含硫酸)作用下,最终转化为黄色,在酶标仪450nm波长上测定吸光度(OD值),吸光度(OD值)与待测样品中人 花生四烯酸(AA)的浓度负相关。拟合校准品曲线,可以计算出样本中人 花生四烯酸(AA)的浓度。
【产品性能指标】
1.外观和物理检查:试剂盒应组分齐全,内外包装均应完整,标签清晰,液体试剂无渗漏。各组分装量不少于表1中要求。
2.线性: 用四参数Logistic曲线拟合(4-pl),在30 μg/mL – 480 μg/mL范围内,剂量-反应曲线相关系数(r)的绝对值应不低于0.9900。
3.精密度
3.1分析内精密度:试剂盒质控品测定结果的变异系数(CV)应不大于15.0%。
3.2批间精密度:在三个不同批次产品之间,质控品测定结果的变异系数(CV)应不大于15.0%
4.最-低检出限:最-低检测浓度小于1.0 μg/mL。
5.质控品测定值: 每次检测结果均应在允许范围内。
【样本要求】
样本类型和采集
以下只是列出样品采集的一般指南。所有样本采集过程中,不得使用叠氮钠做为防腐剂。
1、细胞培养上清:4000rpm条件下离心20min,去除细胞颗粒和聚合物,上清液保存在- 20℃以下,避免反复冻融。
2、血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作过程中避免任何细胞刺激,4000rpm条件下离心20min,小心地分离出血清,保存在- 20℃以下,避免反复冻融。
3、血浆:肝素,EDTA,或柠檬酸钠作为抗凝剂。在4000rpm条件下,离心20分钟取上清,血浆保存在-20℃以下,避免反复冻融。
4、组织匀浆:用预冷的PBS (0.01 M,pH=7.4)冲洗组织,去除残留血液,称重后将组织剪碎。将剪碎的组织与对应体积的PBS(一般按1: 9的重量体积比,比如1g的组织样品对应9 mL的PBS,具体体积可根据实验需要适当调整,并做好记录。推荐在PBS中加入蛋白酶抑制剂)加入玻璃匀浆器中,在冰上充分研磨。为了进一步裂解组织细胞,可以对匀浆液进行超声破碎或反复冻融。最后将匀浆液5000×g离心 5-10分钟,取上清检测。
人花生四烯酸(AA)ELISA检测试剂盒