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产品名称:小鼠孕酮(PROG)ELISA检测试剂盒
有效期:6个月
保存条件:2-8℃
用途:用于体外定量检测血清、血浆、组织匀浆及相关液体样本中小鼠孕酮(PROG)的含量。
【检验原理】
试剂盒采用酶联免疫分析方法。采用生物-素标记PROG,纯化的抗PROG抗体包被微孔板,在竞争抑制反应中,一定量的固相抗体与生物-素标记PROG及非标记抗原(校准品或标本)进行抑制竞争反应,抗体与生物-素标记的PROG结合量受非标记抗原量所抑制,非标记抗原量多,抗体与生物-素标记的PROG结合就少,反之结合就多;反应平衡后,形成固相抗体-生物-素化PROG,再加入酶标记的亲和素,形成固相抗体-生物-素化PROG-酶标-亲合素复合物。经加底物显色后,用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值)。随着PROG浓度的升高,OD值逐渐下降呈良好的线性关系。本试剂盒具有灵敏度高、特异性强、重复性好、操作简单、快速等特点,对血清中PROG的减少或升高有可靠的检出性能。
【检验方法】
试剂准备
1、使用前,所有的组分都要至少复温30min,确保充分复温到室温。
2、浓缩洗涤液:从冰箱取出的浓缩洗涤液,会有结晶产生,这属于正常现象,水浴加热使结晶完-全溶解。浓缩洗涤液与蒸馏水,按1:20稀释,即1份的浓缩洗涤液,添加19份的蒸馏水。
操作程序
1. 将各种试剂移至室温平衡两小时,取浓缩洗涤液,根据当批检测数量,用蒸馏水1:20稀释,混匀后备用。
2. 将预包被板从密封袋中取出,设一个空白对照孔,不加任何液体;每个校准品设2孔,每孔加入对应校准品50μl;其余每个检测孔直接加待测血清或质控品50μl。
3. 除空白孔外所有孔加入生物-素化抗原50μl,混匀,贴上封板膜,置37℃温育60分钟。
4. 手工洗板:弃去孔内液体,洗涤液注满各孔,静置10秒甩干,重复3次后拍干。洗板机洗板:选择洗涤3次程序洗板后拍干。
5. 每孔加入酶标亲合素50μl(空白对照孔除外),混匀,贴上封板膜,置37℃温育30分钟。
6. 手工洗板:弃去孔内液体,洗涤液注满各孔,静置10秒甩干,重复3次后拍干。洗板机洗板:选择洗涤3次程序洗板后拍干。
7. 每孔加显色剂A 50μl,显色剂B 50μl,振荡混匀后,置37℃避光显色15分钟,每孔加终止液50μl。
8. 用酶标仪读数,取波长450nm,先用空白对照孔调零点,然后测定各孔光密度值(OD值)。
小鼠孕酮(PROG)ELISA检测试剂盒