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产品名称:小鼠褪黑素(MT)ELISA检测试剂盒
英文名称:Mouse MT Elisa Kit
货号:XFM21208
规格:48T/96T
储存条件:2-8℃
有效期:6个月
用途:用于体外定量检测血清、血浆、组织匀浆及相关液体样本中小鼠褪黑素(MT)的含量。
检验原理
试剂盒采用酶联免疫分析方法。采用生-物素标记MT,纯化的抗MT抗体包被微孔板,在竞争抑制反应中,一定量的固相抗体与生-物素标记MT及非标记抗原(校准品或标本)进行抑制竞争反应,抗体与生-物素标记的MT结合量受非标记抗原量所抑制,非标记抗原量多,抗体与生-物素标记的MT结合就少,反之结合就多;反应平衡后,形成固相抗体-生-物素化MT,再加入酶标记的亲和素,形成固相抗体-生-物素化MT-酶标-亲合素复合物。经加底物显色后,用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值)。随着MT浓度的升高,OD值逐渐下降呈良好的线性关系。本试剂盒具有灵敏度高、特异性强、重复性好、操作简单、快速等特点,对血清中MT的减少或升高有可靠的检出性能。
产品性能指标
1. 外观和物理检查:试剂盒应组分齐全,内外包装均应完整,标签清晰,液体试剂无渗漏。各组分装量不少于表1中要求。
2. 线性: 用四参数Logistic曲线拟合(4-pl),在2.5 pg/mL – 80 pg/mL范围内,剂量-反应曲线相关系数(r)的绝对值应不低于0.9900。
3. 精密度
3.1分析内精密度:试剂盒质控品测定结果的变异系数(CV)应不大于15.0%
3.2批间精密度:在三个不同批次产品之间,质控品测定结果的变异系数(CV)应不大于15.0%
4. 最-低检出限:最-低检测浓度小于0.1 pg/mL。
5. 质控品测定值: 每次检测结果均应在允许范围内。
样本要求
样本类型和采集
以下只是列出样品采集的一般指南。所有样本采集过程中,不得使用叠氮钠做为防腐剂。
1、细胞培养上清:4000rpm条件下离心20min,去除细胞颗粒和聚合物,上清液保存在- 20℃以下,避免反复冻融。
2、血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作过程中避免任何细胞刺激,4000rpm条件下离心20min,小心地分离出血清,保存在- 20℃以下,避免反复冻融。
3、血浆:肝素,EDTA,或柠檬酸钠作为抗凝剂。在4000rpm条件下,离心20分钟取上清,血浆保存在-20℃以下,避免反复冻融。
4、组织:用预冷的PBS (0.01 M,pH=7.4)冲洗组织,去除残留血液,称重后将组织剪碎。将剪碎的组织与对应体积的PBS(一般按1: 9的重量体积比,比如1g的组织样品对应9 mL的PBS,具体体积可根据实验需要适当调整,并做好记录。推荐在PBS中加入蛋白酶抑制剂)加入玻璃匀浆器中,在冰上充分研磨。为了进一步裂解组织细胞,可以对匀浆液进行超声破碎或反复冻融。最后将匀浆液5000×g离心 5-10分钟,取上清检测。
小鼠褪黑素(MT)ELISA检测试剂盒