红细胞内原虫(疟原虫)染色液 生化试剂
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红细胞内原虫(疟原虫)染色液,被疟原虫感染的红细胞保留残影,呈淡红色,尤其是在晚期滋养体及裂殖体感染的红细胞残影更为明显,其它红细胞多被溶解。
红细胞内原虫(疟原虫)染色液
[储存条件及有效期]
本试剂盒应置室温密封保存,有效期一年。
[涂片及染色的操作步骤]
1、血涂片厚片的制作及染色
① 血涂片厚片制作
取全血 4 微升左右(1/4 火柴头大小) 置干净的载玻片上,用推玻片一角由内向外同一方向匀速画圈涂均,大小约 1cm?,血膜不宜过厚,一般约 3 层红细胞左右,室温晾干。
② 血涂片的厚片染色
a、将已晾干的厚的血涂片平置于染色架上,滴加前处理试剂 3~5 滴,使其迅速盖满厚血膜,溶血 30 秒左右(20~40 秒),倒丢(不要冲洗)
b、滴加姬民试剂一3~5 滴,使其迅速盖满厚血膜,染色 40 秒左右(30~60 秒),以固定并染色厚血膜。
C、不要倒丢姬氏试剂一,直接滴加姬氏试剂二6~10 滴(民试一的2 倍量),轻摇玻片或用洗耳球对准血涂片吹气使染液充分混合,染色 2~3 分钟,倒丢染色液并立即水洗 30 秒,待干后油镜镜检 (可封片镜检也可滴香柏油镜检)。
2、血涂片薄片的制作及染色
① 血涂片的薄片制作
取全血 2 微升左右置干净的载玻片上,将推玻片保持与载玻片 30 度角,置于血滴正前方,稍往后移与血滴接触,即可见血液沿推片下缘散开,再匀速沿载玻片平面平稳向前滑动,至血液铺完血膜为止,室温晾干。
② 血涂片的薄片染色
a、将已晾干的薄的血涂片平置于染色架上,滴加姬氏试剂一3~5 滴,使其迅速盖满薄血膜,染色 1分钟左右,以固定并染色薄血膜。
b、不要倒丢姬氏试剂一,直接滴加姬氏试剂二 6~10 滴,轻摇玻片或用洗耳球对准血涂片吹气使染液充分混合,染色 5~8 分钟。
c、水洗 30 秒,待干后镜检。
3、同一张载玻片上厚、薄血片的制作及染色
① 同一张载玻片上厚、薄血片的制作
取全血 2 微升左右,置于载玻片的右前方,将推玻片保持与载玻片 30 度角,稍往后移与血滴接触,即可见血液沿推片下缘散开,再匀速沿载玻片平面平稳向左滑动,至血液铺完血膜为止(注意:不要超过玻片的 /3):仍在此张玻片的左半边的中心滴全血 4 微升左右(1/4 火柴头大小)用推玻片一角由内向外同一方向匀速画圈涂均,大小约 1cm?,血膜不宜过厚,一般约 3 层红细胞左右,室温晾干。
② 厚、薄血涂片同时染色
a、将已晾干的涂在同一张载玻片上的厚、薄血涂片平置于染色架上,在厚血片部分滴加前处理试剂3~5 滴(注意: 不可滴在薄血片部分),溶血 30 秒左右(20~40 秒)倒丢(不要冲洗)。注意: 只溶厚血膜,不溶薄血膜。
b、滴加姬氏试剂一 5~6 滴,使其迅速盖满厚、薄血膜,染色 40 秒左右(30~60 秒),以固定并染色厚、薄血膜。
C、不要倒丢姬氏试剂一,直接滴加姬氏试剂二 10~12 滴(是氏试剂一的2 倍量),C轻摇玻片或用洗耳球对准血涂片吹气使染液充分混合,厚、薄血膜染色 2~3 分钟倒丢染色液并立即水洗 30 秒,待干后油镜镜检(可封片镜检也可滴香柏油镜检)
染色结果
被疟原虫感染的红细胞保留残影,呈淡红色,尤其是在晚期滋养体及裂殖体感染的红细胞残影更为明显,其它红细胞多被溶解。疟原虫染色清晰,其形态基本不变,原虫细胞核呈紫红色,细胞浆呈淡蓝色,疟色素呈棕色或褐色,空泡不着色或着色即淡,区分清楚,容易鉴别,此片亦可长期保存。
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红细胞内原虫(疟原虫)染色液