红细胞内原虫(疟原虫)染色液​ 生化试剂

红细胞内原虫(疟原虫)染色液

[储存条件及有效期]

本试剂盒应置室温密封保存，有效期一年。

[涂片及染色的操作步骤]

1、血涂片厚片的制作及染色

①　血涂片厚片制作

取全血 4 微升左右(1/4 火柴头大小) 置干净的载玻片上，用推玻片一角由内向外同一方向匀速画圈涂均，大小约 1cm?，血膜不宜过厚，一般约 3 层红细胞左右，室温晾干。

②　血涂片的厚片染色

a、将已晾干的厚的血涂片平置于染色架上，滴加前处理试剂 3~5 滴，使其迅速盖满厚血膜，溶血 30 秒左右(20~40 秒)，倒丢(不要冲洗)

b、滴加姬民试剂一3~5 滴，使其迅速盖满厚血膜，染色 40 秒左右(30~60 秒)，以固定并染色厚血膜。

C、不要倒丢姬氏试剂一，直接滴加姬氏试剂二6~10 滴(民试一的2 倍量)，轻摇玻片或用洗耳球对准血涂片吹气使染液充分混合，染色 2~3 分钟，倒丢染色液并立即水洗 30 秒，待干后油镜镜检 (可封片镜检也可滴香柏油镜检)。

2、血涂片薄片的制作及染色

①　血涂片的薄片制作

取全血 2 微升左右置干净的载玻片上，将推玻片保持与载玻片 30 度角，置于血滴正前方，稍往后移与血滴接触，即可见血液沿推片下缘散开，再匀速沿载玻片平面平稳向前滑动，至血液铺完血膜为止，室温晾干。

②　血涂片的薄片染色

a、将已晾干的薄的血涂片平置于染色架上，滴加姬氏试剂一3~5 滴，使其迅速盖满薄血膜，染色 1分钟左右，以固定并染色薄血膜。

b、不要倒丢姬氏试剂一，直接滴加姬氏试剂二 6~10 滴，轻摇玻片或用洗耳球对准血涂片吹气使染液充分混合，染色 5~8 分钟。

c、水洗 30 秒，待干后镜检。

3、同一张载玻片上厚、薄血片的制作及染色

①　同一张载玻片上厚、薄血片的制作

取全血 2 微升左右，置于载玻片的右前方，将推玻片保持与载玻片 30 度角，稍往后移与血滴接触，即可见血液沿推片下缘散开，再匀速沿载玻片平面平稳向左滑动，至血液铺完血膜为止(注意:不要超过玻片的 /3):仍在此张玻片的左半边的中心滴全血 4 微升左右(1/4 火柴头大小)用推玻片一角由内向外同一方向匀速画圈涂均,大小约 1cm?，血膜不宜过厚，一般约 3 层红细胞左右，室温晾干。

②　厚、薄血涂片同时染色

a、将已晾干的涂在同一张载玻片上的厚、薄血涂片平置于染色架上，在厚血片部分滴加前处理试剂3~5 滴(注意: 不可滴在薄血片部分)，溶血 30 秒左右(20~40 秒)倒丢(不要冲洗)。注意: 只溶厚血膜，不溶薄血膜。

b、滴加姬氏试剂一 5~6 滴，使其迅速盖满厚、薄血膜，染色 40 秒左右(30~60 秒),以固定并染色厚、薄血膜。

C、不要倒丢姬氏试剂一，直接滴加姬氏试剂二 10~12 滴(是氏试剂一的2 倍量),C轻摇玻片或用洗耳球对准血涂片吹气使染液充分混合，厚、薄血膜染色 2~3 分钟倒丢染色液并立即水洗 30 秒，待干后油镜镜检(可封片镜检也可滴香柏油镜检)

染色结果

被疟原虫感染的红细胞保留残影，呈淡红色，尤其是在晚期滋养体及裂殖体感染的红细胞残影更为明显，其它红细胞多被溶解。疟原虫染色清晰，其形态基本不变，原虫细胞核呈紫红色，细胞浆呈淡蓝色，疟色素呈棕色或褐色，空泡不着色或着色即淡，区分清楚,容易鉴别，此片亦可长期保存。

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红细胞内原虫(疟原虫)染色液