蛋白质羰基含量测试盒 生化试剂
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蛋白质羰基含量测试盒,可简便、灵敏的检测各种组织器官、血清、培养细胞(做法同组织样本)和细胞器等蛋白质羰基含量。
蛋白质羰基含量测试盒
(紫外比色法)
一、试剂组成和配制(50 管/24 样,货号 A087-1-1):
试剂一:匀浆介质,无色透明液体,50mL×1 瓶;4℃保存;
试剂二:浅砖红色液体,2.5mL×1 瓶;4℃避光保存;
试剂三:黄色液体,10mL×1 瓶;4℃避光保存;
试剂四:无色液体,10mL×1 瓶;4℃保存;
试剂五:无色液体,30mL×1 瓶;4℃保存;
试剂六:无色液体,70mL×1 瓶;4℃保存;
自备试剂:无水乙醇(分析纯);乙酸乙酯(分析纯);
洗涤液的配制:将无水乙醇和乙酸乙酯按照体积比 1︰1
的比例混合配置成溶液,现用现配;
二、试剂组成和配制(100 管/48 样,货号 A087-1-2):
试剂一:匀浆介质,无色透明液体,100mL×1 瓶;4℃保存;
试剂二:浅砖红色液体,5mL×1 瓶;4℃避光保存;
试剂三:黄色液体,20mL×1 瓶;4℃避光保存;
试剂四:无色液体,20mL×1 瓶;4℃保存;
试剂五:无色液体,60mL×1 瓶;4℃保存;
试剂六:无色液体,70mL×2 瓶;4℃保存;
自备试剂:无水乙醇(分析纯);乙酸乙酯(分析纯);
洗涤液的配制:将无水乙醇和乙酸乙酯按照体积比 1︰1
的比例配置成混合溶液,现用现配;
三、操作步骤:
1、血清(浆)前处理:取血清或血浆原液进行测定(同时用
双缩脲试剂盒(本所有售,货号 A045-1)测定血清(浆)
中总蛋白浓度);
2、组织样本前处理:准确称取组织重量,按重量(g):体积
(mL)=1︰9 的比例加入 9 倍的试剂一(如准确称取组织
重量 0.1g 加入 0.9mL 的试剂一),冰水浴条件下机械匀
浆,2500 转/分,离心 10min,取上清即 10%匀浆 450µL,
加入 50µL 试剂二,混匀,室温放置 10min 后,
11000r/min
离心 10min,取上清按操作表测定(同时取部分上清用考
马斯亮蓝试剂盒(本所有售,货号 A045-2)测定匀浆的
总蛋白浓度);
四、测定意义:
一种检测蛋白质羰基含量的试剂盒。可简便、灵敏的
检测各种组织器官、血清、培养细胞(做法同组织样本)
和细胞器等蛋白质羰基含量。其使用不需要昂贵的设备,
样品处理简单,可广泛应用于各种疾病如衰老、动脉硬化
症,糖尿病和帕金森综合症、风湿性关节炎等疾病的早期
诊断,抗氧化保健食品、抗氧化药物和化妆品等的评价,
还可以用于评价由于一些环境有害因子如辐射、化学毒物
等对机体造成的氧化损伤。
五、实验注意点:
1、在用无水乙醇乙酸乙酯混合应用液对反应沉淀进行洗
涤时,漩涡混匀一定要剧烈充分,混匀时间不得少于一
分钟,反应沉淀物必须洗涤至白色,如果沉淀物还有黄
色残留,适当增加无水乙醇乙酸乙酯混合应用液的洗涤
次数,以保证洗涤充分,否则会使得测定结果偏高;
2、在进行蛋白质羰基测定时,离心的转速不可以随意降
低,否则会使得测定结果偏高;
3、在进行蛋白质羰基测定时,建议使用圆底的离心管进
行实验,这样在进行无水乙醇乙酸乙酯混合应用液洗涤
时,可以保证沉淀被充分洗涤。不建议使用尖底的离心
管进行实验。
蛋白质羰基含量测试盒