超微量 Na +K+ Ca 2+Mg 2+ 总 ATP 酶测试盒 生化试剂

超微量 Na +K+ Ca 2+Mg 2+ 总 ATP 酶测试盒

（测红细胞）

一、试剂组成与配制：

二、红细胞的前处理：

1、红细胞计数（见附录）或血红蛋白测定（试剂本所有售）。

2、红细胞溶血液的制备：

①、压积红细胞溶血液的制备：取肝素抗凝全血，1000

转/分，离心 10 分钟，弃上层血清，留下层压积红细

胞，取一定量的压积红细胞，加 49 倍的双蒸水，例

如取 5μl 的压积红细胞加入 245μl 双蒸水中，混匀，

使其充分溶血，对光观察直至溶液透亮。如果预试结

果太高，再将溶血液稀释成不同浓度再进行预试后，

再决定取样浓度。

②、全血红细胞溶血液的制备：取小鼠全血，轻轻摇匀，

取一定量的全血按照 1：24 的体积比加 24 倍双蒸水，

制成 25 倍稀释的溶血液，例如取 5ul 的全血加双蒸水

120ul 充分混匀，制成 25 倍稀释的溶血液。对光观察

直至溶液透亮。如果预试结果太高，再将溶血液稀释

成不同浓度再进行预试后，再决定取样浓度。

[注 1]：制备好的溶血液尽快进行检测，否则易失活，因而必

须在所有的准备工作做好以后再配制溶血液。

[注 2]：用不完的抗凝全血 4℃可保存 2～3 天， -20℃以下保

存一周或者更长时间。

[注 3]：不可用磷酸盐缓冲液或含磷的试剂稀释样本。

[注 4]：预试结果将绝对吸光度值（测定管吸光度值—对照管

吸光度值）控制在 0.2 左右为宜。

附录Ⅰ：红细胞计数法

红细胞计数有以下三种方法，只需取其中一种即可以。

1、计数板直接红细胞计数：

①、红细胞稀释液的配制：柠檬酸三钠 3.8 克，甲醛 1mL，

双蒸水 100mL，混匀，4℃保存。

②、取 1 支试管，加入红细胞稀释液 2mL，取抗凝全血 10µL

加入试管稀释液中，反复吹吸数次，再将试管颠倒数次

混匀。

③、取一滴稀释血液灌入计数板。（应一次灌满，而且不要灌

得太多。）

④、用高倍镜计数左上、左下、右上、右下，中央 5 个中方

格的红细胞数，将数得的数字×10 10，即为每升血中的红

细胞数。

2、光电比浊法计红细胞数：

取试管 1 支，加入上述红细胞稀释液 4mL，再取 20µL

抗凝全血，加入 4mL 稀释液中，反复吹吸数次，再将试管颠

倒数次混匀，立即倒入比色杯中，于 540nm，1cm 光径，双

蒸水调零进行比色，记下吸光度值。以计数板计数的红细胞

的数值为横坐标，以相应管的吸光度值为纵坐标，作标准曲

线。您可以不做曲线，用附录Ⅱ参考标准曲线图二（鼠红细

胞数与比浊法吸光度换算曲线）。根据标准曲线查出红细胞

数。

3、用血红蛋白（Hb）来换算红细胞数：

取 10µL 抗凝全血加入 2.5mL 血红蛋白测试液（本所有

供应）中，混匀，静置 10 分钟，于 540nm，1cm 光径，双

蒸水调零进行比色。将测得的吸光度乘以 367.7 即为血红蛋

白的值。以计数板计数的红细胞的数值为横坐标，以相应管

的血红蛋白数为纵坐标，作标准曲线。您可以不做曲线，用

附录Ⅱ的参考标准曲线图一（鼠红细胞数与血红蛋白数的换

算曲线）。根据标准曲线查出红细胞数。

超微量 Na +K+ Ca 2+Mg 2+ 总 ATP 酶测试盒