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低-密度脂蛋白胆-固醇(LDL-C)测试盒 生化试剂

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低-密度脂蛋白胆-固醇(LDL-C)测试盒,培养液样本:吸取培养液,1000 转/分钟,离心 10分钟,取上清测定。

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低-密度脂蛋白胆-固醇(LDL-C)测试盒

(直接法 微板法)

一、试剂组成及配制(96T):

2.png

 

二、测定步骤:

1、样本处理:

①、血清()直接测定,如超过线性范围用生理盐水稀

释后测定。

②、培养液样本:吸取培养液,1000 /分钟,离心 10

分钟,取上清测定。

[]:一般建议细胞密度在 100 万个/mL 以上。

③、组织样本:准确称取组织重量,按重量(g):体积

(mL)=19 的比例,加入 9 倍体积的匀浆

介质,冰水浴条件下机械匀浆,2500 /

分,离心 10 分钟,取上清液待测。

[]:1、如组织样本为非高脂样本,匀浆介质统一用磷酸

盐缓冲液(0.1mol/L pH 7.4)或生理盐水进行提取。

2、如组织样本为高脂样本或部分为高脂样本,匀浆

介质可统一用无水乙醇进行提取。

④、细胞样本:

A、细胞收集:将制备好的细胞悬液取出,1000 /

分,离心 10 分钟,弃上清液,留细胞沉淀;用

等渗缓冲液(推荐 0.1mol/L pH77.4 磷酸盐

缓冲液)清洗 12 次,同样 1000 /分,离心

10 分钟,弃上清液,留细胞沉淀;

B、细胞破碎:加入 0.20.3mL 的匀浆介质(推荐

0.1mol/LpH77.4 磷酸盐缓冲液或生理盐水)

进行匀浆,冰水浴条件下超声破碎(功率:300W

35 /次,间隔 30 秒,重复 35 )或手动匀

浆,制备好的匀浆液不离心直接测定。也可采

用裂解液裂解(推荐 TritonX-10012%,裂解

3040 分钟),裂解好的液体不离心直接测定。

[]:一般建议细胞密度在 100 万个/mL 以上。破碎好的

液体可显微镜观察细胞是否破碎

七、参考文献:

1 、 G Schectman,M Patsches,EA Sasse.Clin.Chem.May

1996;42:732-737.

 低-密度脂蛋白胆-固醇(LDL-C)测试盒

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