上海信帆提供促激素（TSH）放免实验代测服务

通用名：碘[125I]人促激素放射免疫分析药盒
汉语拼音：Dian [125I] Rencujiazhuangxianjisu Fangshemianyifenxi Yaohe
英文名：Iodine [125I] Human Thyroid Stimulating Hormone Radioimmunoassay Kit
[使用目的]
用于人血清样本中促激素(TSH)的定量测定
[试验原理]
促激素（TSH）是含211 个氨基酸的糖蛋白类激素，分子量约为28,000D，由α
和β两个亚基组成。TSH 主要受下丘脑分泌的促激素释放激素（TRH）和血液中游离
的激素（T3、T4）的调节。TRH 可促进TSH 的分泌，T3、T4 对TSH 的分泌起负反馈
调节作用。另外，下丘脑分泌的生长激素释放抑制激素（SS）和肾上腺皮质分泌的糖皮质
激素可降低TSH 的分泌，而雌激素可增加其分泌。
本品采用了第二抗体＋聚已二醇沉淀法放射免疫分析试验原理：含促激素(TSH)的样
品和125I 标记的促激素(TSH)与相应的抗体反应形成抗原抗体复合物。反应后加入二
抗及PEG，使免疫复合物沉淀，离心，测沉淀放射性计数。通过标准曲线得到样本中促甲
状腺激素(TSH)的浓度。
[试剂主要组成成分]
1.TSH 标准品：
一套共6 瓶，以不含TSH 的人血清为基质，用时轻轻摇匀，需冷存。
TSH 标准品浓度：
A B C D E F （单位）
0 1 5 10 25 50 μIU/mL
2.质控品：二瓶，1.0ml／瓶，-20℃冻存（2-8℃保存六周）。。
3.抗TSH 血清： 绿色溶液，需2-8℃冷存。
4.125I-TSH： 红色溶液，需2-8℃冷存。
5.分离剂： 蓝色溶液，充分摇匀后使用，需2-8℃冷存。
[仪器]
1、γ－计数器
2、低温离心机
3、恒温水浴箱
[样本要求]
110 微升人血清样本。
采静脉血5ml 于塑料试管中，静置使其凝固后，1500 转／分离心，取其上清液，放置玻
璃瓶中。如果样本不立即使用，可在-18℃~-25℃储存6 个月。
严重溶血、高浓度的脂类、胆红素对测定结果有影响。
[实验方法]
操作方法I：
1、将实验所需试剂及样本放置室温，平衡至少30 分钟以上才可进行操作；
2、取60X12mm 聚苯乙烯管进行编号，所有实验均做双管重复；
3、取每个浓度的标准品、质控血清和样本200μl 加入相应编号的试管中；
4、除T、NSB 管外，每管均各加入200μl 抗体工作液，充分混匀；
5、37℃温育1.5 小时；
6、每管均各加入200μl 标记物工作液，充分混匀；
7、37℃温育1 小时；
8、每管均各加入500μl 分离剂后，充分混匀；
9、离心3500 转／分，20 分钟后，吸去或倾倒掉上清液；
10、用γ-计数器测定每管1 分钟的放射性强度计数；
11、从标准曲线上读取样本及质控血清的浓度。
操作方法Ⅰ (OperationⅠ)： （单位μL）
T
NSB 标准品质控品和人样品
A（B0） B C D E F L H 1 2 3 …..
标准品(STD)
A 200 200
标准品(STD)
B－F 200 200 200 200 200
质控品和样品200 200 200 200 200 ….
抗TSH 血清
混匀，置37℃水浴温育90 分钟
125I-TSH
混匀，置37℃水浴温育60 分钟
分离剂500
摇匀，3000RPM 离心20 分钟（温度低于25℃）
吸去上清液
沉淀物计数1 分钟
操作方法II：
1、将实验所需试剂及样本放置室温，平衡至少30 分钟以上才可进行操作；
2、取60X12mm 聚苯乙烯管进行编号，所有实验均做双管重复；
3、取每个浓度的标准品、质控血清和样本200μl 加入相应编号的试管中；
4、每管均各加入200μl 标记物工作液；
200
200
5、除T、NSB 管外，每管均各加入200μl 抗体工作液，充分混匀；
6、室温（20～25℃）放置12~16 小时；
7、每管均各加入500μl 分离剂后，充分混匀；
8、离心3500 转／分，20 分钟后，吸去或倾倒掉上清液；
9、用γ-计数器测定每管1 分钟的放射性强度计数；
10、从标准曲线上读取样本及质控血清的浓度。
操作方法Ⅱ： （单位μL）
T
NSB 标准品质控品和人样品
A（B0） B C D E F L H 1 2 3 …..
标准品(STD)
A 200 200
标准品(STD)
B－F 200 200 200 200 200
质控品和样品200 200 200 200 200 ….
抗TSH 血清
125I-TSH
混匀,室温放置12~16 小时
分离剂500
摇匀，3000RPM 离心20 分钟（温度低于25℃）
吸去上清液
沉淀物计数1 分钟
[实验过程中应注意]
1、γ-计数器本底计数应≤100CPM/分，效率应≥75％；
2、加入放射性标记物时，应做好防护、小心谨慎，以避免造成放射性污染；
3、如果某一个样本的测定值高于浓度的标准品浓度，用零标准品以1：2 或1：
4 的比例稀释样本后重新测试，测试结果乘以相应的稀释倍数。
[质量控制]
每次实验操作应至少采用两个浓度的质控血清进行质量控制，以确保每次实验测定结果
的可靠性。
1、质控血清的平均值应在允许范围内；
2、曲线方程应采用拟合方式；
3、重复样本的测定结果相差在15％以内。
如不能同时满足以上条件，则此次试验结果无效，全部试验需重新进行。
[测定结果的计算]
200
200
1、计算标准品（B~G）、质控品和样品与标准品A 的比值（B/B0）;
2、剂量-反应曲线按“对数剂量-结合率对数”（Log(dose-Log(B/Bmax))数学模型或
四参数数学模型拟合，通过每个标准品的B/B0 和其浓度建立标准曲线；
3、从标准曲线上查出样本的浓度值，B/B0 不在标准曲线之内的样本及其浓度
[实验的局限性]
1、本品仅供体外诊断使用，只能用于人血清样本的测定而不能用于其他体液样本；
2、通过其它方法得到的TSH 值与本品测定结果不具有直接的可比性；
[产品性能指标]
1、灵敏度：
取药盒中校准试剂A 点（0 剂量）作10 平行管，求其均值X 及偏差SD，从剂量—反应
曲线上查出与X+2SD 相对应的剂量值，确定为本药盒的灵敏度（小检出值），为0.25
μIU/mL。
2、精密度：
精密度是质量控制的基本参数，用批内变异系数和批间变异系数确定。要求批内变异系
数< 10% ，批间变异系数< 15% 。
批内变异系数:指不同浓度的三个样品C1、C2、C3 同时分别进行多个复管一次测定中
的重复性，应小于10%。
C1 C2 C3
批内变异系数7.56% 5.34% 5.19%
批内变异系数均小于10%。
批间变异系数:指不同浓度的三个样品C1、C2、C3 在多次测定间的重复性，应小于15%。
C1 C2 C3
批间变异系数10.38% 9.35% 5.71%
批间变异系数均小于15%。
3、测定范围：
采用零标准品添加高浓度的TSH,确定本试剂盒的测定范围为0 ～ 50.0μIU/mL
[注意事项]
1、全部试剂应避光贮于2-8℃并在使用前应在室温下（17-27℃）平衡。
2、该产品在制备过程中所用的血清均经检测，他们对HBsAg、HIV 无反应。但即使这样也
不会保证对所有的传染性因素进行检测。由于没有一个明确的测试方法能*保证不会出现
HBsAg、HIV 或其他传染病毒，所以所有的产品包括来自人体的物质都应按良好的实验室规
B/B0×100 = 标准或样品(STD or Samples)(CPM)—NSB(CPM)
A 标准(STD)(CPM)—NSB(CPM)
×100
范，按疾病预防和控制中心的有关规定要求进行预防。
3、样本浓度过高，在分析前用保温液稀释，结果乘以稀释倍数。
4、血清正常值，仅供参考，使用单位应建立自己实验室的正常值。
正常血清参考值0～10 μIU/mL
5、本药盒标准品浓度用国家标准（卫生部生物制品检定所提供标准80/558）标定需乘
以系数2.3
[规格] 100 人份／盒
[储藏]冷冻组份-20℃,冷藏组份2～8℃。
[有效期] 1 个月

上海信帆提供促激素（TSH）放免实验代测服务