样本保存不当很容易影响ELISA实验的结果

 

大家在做实验的时候，样本的收集和保存尤为重要，样本收集保存不当，可能对您的结果产生很严重的影响，下面让我们信帆生物的技术给大家讲解一下样本应该怎么保存和收集！

 

（1）标本溶血 由于各种人为原因引起的标本溶血，均可因红细胞破坏溶解时释放出大量具有过氧化物酶活性的血红蛋白，在以辣根过氧化物酶为标记的 ELISA 测定中，会导致非特异性显色，干扰测定结果。为克服上述干扰作用，标本采集时必须注意避免溶血。

 

（2）标本受细菌污染 因菌体中可能含有内源性辣根过氧化物酶，因此，被细菌污染的标本同溶血标本一样，亦可产生非特异性显色而干扰测定结果。

 

（3）标本保存不当 在冰箱中保存过久的标本，血清中 IgG 可聚合成多聚体、AFP 可形成二聚体，在间接法 ELISA 测定中会导致本底过深、甚至造成假阳性；标本放置时间过长（如一天以上），有时抗原或抗体免疫活性减弱，亦可出现假阴性。为克服上述干扰，ELISA 测定的血清标本宜为新鲜采集；如不能立即测定，5 天内测定的血 清标本可存放于 4℃，1 周后测定的血清标本应低温冻存；冻存后融解的标本，蛋白质局部浓缩，分布不均，应充分混合后再测定，但混匀时应轻柔，不可强烈振 荡。

 

（4）标本凝集不全 在没有促凝剂和抗凝剂存在的情况下，正常血液采集后 1/2~2 h 开始凝固，18~24 h *凝固。检验工作中，有时为了争取时间快速检测，常在血液还 未开始凝固时即强行离心分离血清，此时的血清中仍残留部分纤维蛋白原，在 ELISA 测定过程中可以形成肉眼可见的纤维蛋白块，易造成假阳性结果；这类情况 于次日复查时因血凝已*，血清中不再有纤维蛋白原存在，故复查结果变为阴性。为避免上述干扰作用，解决的办法是血液标本采集后必须使其充分凝固后再 分离血清，或标本采集时用带分离胶的采血管或于采血管中加入适当的促凝剂。