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谷-胱甘肽(GSH)测定试剂盒 生化试剂

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谷-胱甘肽(GSH)测定试剂盒,二硫代二硝基苯甲酸与巯基化合物反应时能产生一种黄色化合物,可进行比色定量测定。

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谷-胱甘肽(GSH)测定试剂盒

(比色法)

一、测定原理:

二硫代二硝基苯甲酸与巯基化合物反应时能产生一种黄色化合物,可进行比色定量测定。

二、试剂组成与配制:(100T/96 样)

试剂一:甲粉×1 瓶,乙液 50ml×1 瓶,4℃保存 6 个月。甲粉: 90100℃的热双蒸水 170ml

充分溶解;

试剂一应用液的配制:将已配好的甲液与乙液充分混合。此为过饱和溶液,室温静置冷却后,如

有结晶,则取上清进行实验,室温保存 6 个月。

试剂二:粉剂×1 瓶,用时加双蒸水至 200ml 溶解,用我所赠送的塑料瓶室温保存 6 个月。

试剂三:粉剂×1 支,用时加双蒸水至 50ml 溶解,避光 4℃保存 6 个月。

试剂四:粉剂×4 支,用时每支加双蒸水 10ml 溶解,避光冷藏可保存 5 天。

试剂五:GSH 标准品粉剂 3.07mg×3 支,4℃保存 6 个月。

试剂六:GSH 标准品溶剂贮备液 10ml×1 瓶,4℃保存 6 个月。

GSH 标准品溶剂应用液的配制: GSH 标准品溶剂贮备液:双蒸水=1:9,加入 9 倍体积的双

蒸水进行稀释,现用现配。

1mmol/L GSH 标准品溶液的配制:GSH 的分子量为 307,每次测定前将 3.07mg GSH

准品加入到 10ml GSH 标准品溶剂应用液中,混匀,

现用现配。

20μmol/L GSH 标准品溶液的配制: 1mmol/LGSH 标准品溶液 0.2ml 加入 GSH 标准品溶

剂应用液 9.8ml, 现用现配。

四、注意事项

1、血液中的 GSH 几乎全部存在于红细胞内,可以用每升全血中 GSH 的克数来表示,也可用

每克 Hb GSH 的含量来表示。

2、计算时应用消光系数,故比色计要校正波长。用标准管计算较方便、准确。

3、吸取上清时,最好用带刻度的 5ml 滴管,或者用移液器,避开表面的一层薄膜,插到上清

液中吸取 2ml 做显色反应。

4、最好每批试验做 2 个标准管、空白管,以减少操作误差。

五、测定意义:

谷-胱甘肽(GSH)是一种低分子清除剂,它可清除 O2 -H2O2LOOH。谷-胱甘肽是谷

氨酸、甘-氨酸和半胱-氨酸组成的一种三肽,是组织中主要的非蛋白质的巯基化合物,并且是

GSH—PX GST 两种酶类的底物,为这二种酶分解氢过氧化物所必需,它并且能稳定含巯

基的酶和防止血红蛋白及其它辅因子受氧化损伤,最近还证明 GSH 也参与使维生素 E 恢复

到还原态的作用,缺乏或耗竭 GSH 会促使许多化学物质或环境因素产生中毒作用或加重其

中毒作用,这可能与增加氧化损伤有关,因而 GSH 的量的多少是衡量机体抗氧化能力大小

的重要因素。

 谷-胱甘肽(GSH)测定试剂盒

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