过氧化物酶(POX)染液 生化试剂

过氧化物酶(POX)染液

(Peroxidase stain沃什伯恩(Washburn)法)

染色原理

粒细胞和单核细胞胞浆中含有过氧化酶，在有受体(如联苯胺) 存在下，催化过氧化氢放出新生态氧，使联苯胺氧化成联苯胺蓝，再与亚硝基氰-化钠结合成稳定的蓝色颗粒定位于细胞浆中，否则联苯胺蓝可继续脱氢，氧化为棕色的苯醒二胺。

储存条件及有效期

本试剂盒应置 4°C保存保存，有效期一年。试剂二应用液一定要现用现配，稀释后的应用液只能保持 2~3 小时。

染色步骤

1、新鲜血片或骨髓片，滴加试剂一染液 5~8 滴 ，不要洗。

2、1~2min 后再滴加试剂二稀释后的应用液 5~8 滴，混匀，放置 4~8min，清水洗。

3、加试剂三 5~8 滴，使覆盖整个血膜，停 30 秒~1 分钟

4、滴加试剂四 5~8 滴，与试剂三混匀，染色 8~10 分钟

5、用清水冲洗，将血片直立晾干，也可用滤纸慢慢吸干。

染色结果

1、 阳性反应强度的判断:

阴性    无颗粒。

弱阳性  颗粒小，分布稀疏。

阳性    颗粒略粗，分布较密集。

强阳性  颗粒粗大，呈蓝黑色，充满胞浆。

2、粒细胞系统:

早期原粒细胞阴性，晚期原粒细胞及以下阶段细胞均含不同程度的蓝黑色、圆形、边缘不整齐、大小不一致的阳性颗粒，随粒细胞的成熟而增多，直至充满细胞浆，嗜酸性粒细胞颗粒更粗大，呈深蓝色。嗜碱性粒细胞正常多为阴性。在病理状态下有时成熟中性粒细胞可呈阴性。

3、单核细胞系统:

性或弱阳性有少数篮色颗粒，较小。，形态不规则，弥散分布，可覆盖核上。

4、网状细胞及吞噬细胞

网状细胞及吞噬细胞有不同程度的阳性颗粒。

5、淋巴细胞、浆细胞、红细胞及巨核细胞系统:

淋巴细胞、浆细胞、红细胞及巨核细胞等均阴性。

过氧化物酶(POX)染液