过氧化物酶(POD)测试盒（测植物） 生化试剂

过氧化物酶(POD)测试盒（测植物）

（测植物）

一、测定原理：

利用过氧化物酶(POD)催化过氧化氢反应的原理,通过测定

420nm 处吸光度的变化得出其酶活性。

二、试剂的组成和配制（100 管/48 样）：

试剂一：60mL 液体×4 瓶,4℃可保存 6 个月。

试剂二：粉剂×3 瓶,4℃可保存 6 个月。

试剂二应用液的配制：临用每瓶粉剂加入 10mL 的双蒸水溶

解， 4℃避光保存。（颜色变深以后弃用）

试剂三：5mL 液体×1 瓶， 4℃可保存 6 个月。

试剂三应用液的配制：临用前用蒸馏水 15～30 倍稀释，使

得在 1cm 光径、波长 240nm 下，蒸馏水调零时，

试剂三应用液的吸光值保持在 0.4 左右，现用现配。

若吸光值太高,则加蒸馏水稀释,若吸光值太低,则

加入适量试剂三。（一般在 25 倍左右稀释）

试剂四：50mL 液体×2 瓶， 4℃可保存 6 个月。

三、操作步骤：

1、前处理：

植物组织匀浆的制备：准确称取植物组织重量，按照重

量（g）

:体积(mL)=1:9 的比例加入 9 倍体积的匀浆介质（推

荐使用生理盐水或磷酸盐缓冲液︰0.1mol /L pH7～7.4），

冰水浴条件下制备成 10％的组织匀浆液，3500 转/分离心

10 分钟后，取上清液进行测定。

五、注意事项：

1、样本测试前请选取2 例预期差异最大的样本，稀释成不同浓度

（推荐 5 倍、10 倍、20 倍稀释）进行预试，选取最佳样本浓

度（测定 OD—对照 OD 在 0.2～0.4 内对应的样本浓度为最佳

浓度）；

2、本试剂盒测定时也可在反应完后吸取 200μL 反应液进入 96

孔板中，酶标仪 420nm（±10nm）处读取吸光值，此时光

径约为 0.576cm（此值为大概值，并无准确依据）代入计算；

3、试剂三在调浓度时，是在分光光度计 240nm（紫外波长）

下，1cm 光径石英比色皿中读数达到 0.4 左右，如非使用

石英材质比色皿，可能无法检测。

 过氧化物酶(POD)测试盒（测植物）