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2018-04-10过氧化物酶(POD)测试盒(测动物组织)
(测动物组织)
一、测定原理:
利用过氧化物酶(POD)催化过氧化氢反应的原理,通过测定 420nm 处吸光度的变化得出其酶活性。
二、试剂的组成和配制(50 管/48 样):
试剂一:60mL 液体×2 瓶,4℃可保存 6 个月。
试剂二:粉剂×2 瓶,4℃可保存 6 个月。试剂二应用液的配制:临用前每瓶加入 10mL 的双蒸水溶解, 4℃
避光保存。(颜色变深以后弃用)
试剂三:5mL 液体×1 瓶,4℃可保存 6 个月。试剂三应用液的配制:临用前用蒸馏水 15~30 倍稀释,使
得在 1cm 光径、波长 240nm 下,蒸馏水调零时,试剂三应用液的吸光值保持在 0.4 左右,现用
现配。若吸光值太高,则加蒸馏水稀释,若吸光值太低,则加入适量试剂三。
(一般在 25 倍左右稀释)
试剂四:50mL 液体×1 瓶,4℃可保存 6 个月。
五、注意事项:
1、本试剂盒测定时也可在反应完后吸取 200μL 反应液进入 96 孔板中,酶标仪 420nm(±10nm)处读取吸
光值,此时光径约为 0.576cm(此值为大概值,并无准确依据)代入计算;
2、试剂三在调浓度时,是在分光光度计 240nm(紫外波长)下,1cm 光径石英比色皿中读数达到 0.4 左右,
如非使用石英材质比色皿,可能无法检测。
3、样本测试前请选取 2 例预期差异的样本,稀释成不同浓度(推荐 5 倍、10 倍、20 倍稀释)进行预试,
选取样本浓度(测定管 OD—空白管 OD 在 0.2~0.4 内对应的样本浓度为浓度);
过氧化物酶(POD)测试盒(测动物组织)