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细菌总蛋白变性提取试剂

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  • 参考价:1.00~1.00

细菌总蛋白变性提取试剂采用离子型去污剂,用于提取细菌中总蛋白,适用于后续的Western Blot等免疫实验。

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所有产品仅供科研使用,不能用于食用和医疗等

细菌总蛋白变性提取试剂

细菌总蛋白提取试剂盒采用温和的离子型去污剂裂解提取,无需超声或反复冻融;加入兼容的蛋白酶抑制剂尽量保证蛋白质的完整性;提取的蛋白质可以用于后续FLAG、poly-His和GST标签蛋白的亲和纯化,也可以兼容许多蛋白的生化测定实验

 操作步骤:

1. 将细菌培养物在预先称重的离心管中4 ºC,5000g 离心15分钟,收集菌体。

2. 去上清,称量菌体重量,按照每克菌体加入10-50ml细菌蛋白抽提试剂Ⅱ(变性),涡旋震荡使菌体*重悬。

3.  室温孵育15-20分钟(孵育时间可根据细胞类型的不同做调整)。

4. 15000g,离心10分钟。

5.   将上清转移至新的离心管中,即得到总蛋白,可应用BCA法进行蛋白定量及后续实验。

 

注意:

1.   该提取试剂中不含有蛋白酶抑制剂,用户可根据具体情况添加蛋白酶抑制剂、还原剂、螯合剂等。

2.   当提取物粘度较高或提取的蛋白以包涵体形式存在时,建议在加入溶菌酶和DNaseⅠ。

3.  如果在提取纯化过表达蛋白的过程中,得到的部分蛋白可能在沉淀中,那么目的蛋白可能以包涵体的形式存在,可使用包涵体蛋白溶解液进行溶液,也可以优化蛋白表达条件,增加可溶性蛋白的表达。

细菌总蛋白变性提取试剂

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