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膜立染(立春红替代品)
丽春红(Ponceau S),也称为猩红S,是一种阴离子偶氮型生物染料,常用于快速、可逆的检测Western Blot(蛋白印迹)膜上的蛋白成分,与PVDF膜,硝酸纤维(NC)膜以及或醋酸纤维素膜兼容。染色原理在于丽春红带负电荷,可与带正电荷的蛋白质氨基基团结合,同时也可以与蛋白质疏水区发生非共价结合,产生背景清晰的红色条带。丽春红对蛋白的染色是可逆的,染色后仅需用蒸馏水,PBS或者其他适当溶液持续冲洗几遍即可*去除,从而用于下游的WB检测或者Dot-ELISA等。
丽春红染色的检测灵敏度稍弱于考马斯亮蓝(Coomassie Blue),但也可直接用于PAGE胶的染色,不过在染色前需先放到固定液如甲醇-醋酸中浸泡一下胶,以达到固定蛋白的作用。胶染色后可用7 %(v/v)醋酸:水溶液中漂洗几分钟,重复多次,以*褪去染色。另外丽春红染色对印迹多肽测序不会产生有害影响,因此也是定位WB印迹测序用多肽的可选方法之一。
本品属于生物染色(BS)级试剂,溶于水呈玫红色,较大吸收波长是520 nm。丽春红染色液常见的有两种配制方法:1)5%醋酸溶液含有0.1% (w/v)丽春红S;2)30% TCA,30% 5-磺基水杨酸溶液含有2%(w/v)丽春红S。
膜立染(立春红替代品)