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糖化血红蛋白(HbA1c)单克隆包被抗体

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糖化血红蛋白(HbA1c)单克隆包被抗体
糖化血红蛋白的含量是由过去的而非即时的血糖浓度决定的,与检测前是否空腹、是否注射胰岛素、是否服用降糖药物等因素无关。通常认为,糖化血红蛋白浓度可有效地反映过去8~12周平均血糖水平。糖化血红蛋白由HbA1a、HbA1b、HbA1c组成,其中HbA1c占约70%,且结构较为稳定,

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糖化血红蛋白(HbA1c)单克隆包被抗体

有人认为单抗比多抗好,其实这并不是一个严谨的观点,只能说在可能性上单抗的特异性更好一些,而多抗的亲和力会优于单抗,并且特异性并不一定就逊于单抗,主要看抗原的设计水平。目前商品化抗体里单抗主要是鼠单抗、兔单抗,多抗主要是兔多抗、山羊多抗等,其他种属来源抗体较少。不建议纠结于单抗好还是多抗好,能做出实验的抗体就是好抗体。


 在选择上一般建议实验种属和抗体种属亲缘性越远越好,不宜同源。抗体不同种属会要影响接下来二抗的选配。特别是在免疫荧光双标实验中,需要在区别于实验种属的基础上,区分开两个指标的抗体种属来源,以便于二抗区别识别。


抗体选择与使用过程中,多少还会遇到一些意想不到的事情。有些细节,还是需要多注意一些。如在选择做阻断或中和实验时,有时需要将抗体加到细胞培养液中,这是需要注意抗体是否含有叠氮钠。如果是大包装的抗体,进行分装是比较节约的方式,如果是高效价的,可以配成母液再分装。抗体的短时间运输,用普通冰块保持温度是可以满足要求的。


另外不要纠结于 WB 过程中分子量的问题。很多时候,我们看到同样的抗体,不同的品牌,甚至同一品牌不同的货号,标注的分子量都不一样。其实可能只是生物试剂商只检测时使用了不同的种属不同的样品类型,或是参照了不同的文献,对使用者来说,同样的样品,不管使用哪个品牌的,只要抗体是对的,目的条带只会出现在相同的位置。关于分子量的问题,一般不建议看产品说明,WB 中条带的位置由样品决定,并不会因为抗体不同而不同。所以在检测蛋白之前,我们可以通过数据库或参考文献,对将要检测的蛋白做个比较全面的了解,包括其可能剪切与修饰的情况、表型的情况等。在第一次使用一个新的抗体时,不要根据分子量横向剪膜,可以保留几个全泳道,看看条带位置或分布的情况。


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