ATP 含量测试盒 生化试剂

ATP 含量测试盒

（100 管/48 样）

一、检测意义：

三磷酸腺苷（adenosine 5'-triphosphate，ATP）是生

物体内能量转换最基本的载体, 其含量的变化直接关系

到各器官的能量代谢。ATP 作为最重要的能量分子在细

胞的各种生理、病理过程中起着重要作用。ATP 水平的

改变，会影响许多细胞的功能。通常细胞在凋亡、坏死

或处于一些毒性状态下，ATP 水平会下降，而高葡萄糖

刺激等对于一些细胞可以上调细胞内 ATP 水平。通常

ATP 水平的下降表明线粒体的功能受损或下降，在细胞

凋亡时 ATP 水平的下降通常和线粒体的膜电位下降同

时发生状态。ATP 含量测定试剂盒可以用于检测红细胞

或组织内的 ATP 水平。

二、测定原理：

肌酸激酶催化三磷酸腺苷和肌酸，生成磷酸肌酸，

用磷钼酸比色法进行检测。

三、试剂组成及配制：（100 管/48 样）（本试剂盒附送双蒸水

一瓶，供客户配试剂时使用）

[注]：本试剂盒中 ATP3# 粉剂-20℃冷冻保存，其余试剂 4℃

保存，有效期 3 个月，开封后有效期为 1 个月。

四、样本前处理：

1、红细胞：抗凝全血取下层压积红细胞，一般按 1：4 的体

积比加双蒸水进行稀释，再混匀使溶血，制备成溶

血液。将制好的溶血液加入玻璃试管中沸水加热煮 10

分钟，取出混匀抽提 1 分钟，4000 转/分钟离心 10 分钟，

取上清液待测。

2、组织样本：准确称取组织重，按重量（g）：体积（ml）

=1：9 的比例，加入 9 倍体积的冷双蒸水，冰水浴匀浆,

制成 10%的匀浆液(取出部分 3500 转/分离心 10 分钟,取

上清测定蛋白浓度)，再置于沸水浴中煮 10 分钟，取出

混匀抽提 1 分钟，3500 转/分离心 10 分钟，取上清液待

测。

3、培养细胞：先离心处理将细胞与培养上清分离，除去培

养上清，得到下层沉淀细胞（一般细胞数量达到 10 6），

将收集好的细胞加入 300～500μL 冷双蒸水，置于冰水

浴中匀浆破碎(取出部分测定蛋白浓度)，后将细胞悬液

于沸水浴中加热 10 分钟，取出混匀抽提 1 分钟，即可

用于测定。[注]：混匀抽提 1 分钟即为漩涡混匀 1 分钟。

六、简便操作表：（如果样本量大，建议将试剂混合后再按照

该表进行操作）

1、混合试剂配制：

工作液 A: 按试剂一:试剂二:试剂三=100:200:30 的比

例配制，现用现配，用多少配多少。

工作液 B: 按试剂一:试剂二=100:200 的比例配制，现

用现配，用多少配多少。

八、注意事项：

1、此法具有微量、灵敏、快速的特点。对测定所用试

管要求严格，要求不能有任何磷污染，建议最好用一

次性塑料试管 ，避免磷污染是检测成败

的关键；

2、显色应用液配好后，不可放置太久，一．般．可．保．存．五．

天．，最好现用现配。随时放冰箱；

3、组织匀浆宜用 2%～5%浓度的匀浆上清，若样本浓度

过高，则底色过深（对照管 OD 过高），需稀释后再

进行测定；一般通过做预试验将对照 OD 值控制在

1.0 以下。

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