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植物总蛋白提取试剂
植物原生质体是指脱去全部细胞壁由质膜包被的具有生命活力的裸露细胞。它具有细胞生命特征和全能型,是细胞无性系变异和突变体筛选的重要来源,同时也是植物遗传工程的理想受体和遗传改良的理想材料。酶解法分离原生质体是一个常用的技术,其原理是植物细胞壁主要由纤维素、半纤维素和果胶质组成,因而使用纤维素酶、半纤维素酶、离析酶和果胶酶能降解细胞壁成分,去除细胞壁,即可得到原生质体。许多方法可诱导原生质体融合,现在被广泛采用的融合方法是聚乙二醇(PEG)法。聚乙二醇(PEG)作为一种高分子化合物,合适的浓度能对原生质体产生瞬间冲击效应,原生质体很快发生收缩与粘连,随后用高钙高pH法进行清洗,使原生质体融合得以完成。
按照每次使用5 ml酶消化体系计算,本试剂盒可用于40次酶消化反应。本试剂盒每个5 ml反应体系可处理0.1 g左右的拟南芥叶片(约10~15叶片),操作较好的情况下每5 ml体系可获得约50-70万个原生质体(不同植物不同操作会有一定的差异),可满足约25-70个样品的原生质体质粒转染操作(按照每样1-2万个细胞计算)。
原生质体转化时,本试剂盒可以用于相当于6孔板40个孔的样品,12孔板80个孔的样品,或24孔板160个孔的样品的转化。
植物总蛋白提取试剂